脂肪诱导用吲哚美辛如何溶解

xuzhijuan1989

购买的sigma的吲哚美辛，用于脂肪细胞诱导，不知道如何溶解，想请教下大家，谢谢！

ditiger

IDM， 分子量357.79 称取89.45mg 溶于5mL 无水乙醇中，0.2μm无菌滤膜过滤后，配成50mmol/L的储存液，-20℃冰箱保存。

jensn

我对2楼的回答有点疑虑：吲哚美辛在丙酮中溶解，在乙醇、甲醇、氯仿或乙醚中略溶，在苯中微溶，在甲苯中极微溶解，在水中几乎不溶。既然再乙醇中是略溶，为什么还用乙醇来溶解，再者，称取89.45mg可不是那么容易的事情，计算你有很精密的电子天平，这称取在转移的过程，可能导致的误差已经不能保证终浓度了。我们的做法是：吲哚镁锌：粉剂sigma17378-5g，储液配置：加2.23ml DMSO溶解成浓缩10000倍的储液1，1ml储液1加9ml alpha-MEM配成浓缩1000倍的储液2，0.2μm无菌滤膜过滤分装，-20℃保存，用时直接取100ul加入100ml培养基。一般做诱导，100ml的诱导液是足够了。

xuzhijuan1989

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; x0 J6 z; l1 z# D2 U; n
我今天用DMSO溶了，5g加了6mlDMSO才溶解

jensn

如果加了6ml，你要注意稀释的倍数了，不然终浓度可能会偏差比较大，不过每个实验室诱导的浓度也有差异。只要你能做出想要的结果就ok！

xuzhijuan1989

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呵呵，好的，谢谢！

huangcong1988

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( a1 I" }7 x1 @. T1 r/ u: E
楼上的方法很好！但是5g全部溶解到2.23mlDMSO中真的还是比较难，所以我还是称量，0.358g粉剂，用10mlDMSO溶解，虽然称量过程中可能有误差，但是也没办法，不然5g吲哚美辛得用到什么时候啊？

huangcong1988

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还有就是我的吲哚美辛用DMSO 溶解之后没有过滤

jensn

具体是先称量还是一起溶解，看个人的需要准备吧，我当时完全溶解是基于保证浓度考虑，分装后做好标记，溶解后置于-20°长期保存也不会影响其使用。如果你觉得称量更好，也未尝不可，本身吲哚美辛的浓度不是卡死的，做成脂诱导相对来说还是比较容易。