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lansedecao

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楼主

发表于 2012-12-28 09:35 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我用nestin primer 去扩增neural-sphere的CDNA ，大脑组织提取物CDNA,就是P不出条带，退火温度:60°，循环次数：305 |8 R3 |' W$ `! r. I
nestin primer F：ACCTATGTCTGAGGCTCCCTATCC
R: AAATAGAGTGGTGAGGGTTGAGGG

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zb_ming

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沙发

发表于 2012-12-29 21:41 |只看该作者

建议楼主多看看先关报道，有现成primer的话直接用，没有的话就要自己多摸索，合成，blast几次，尤其是退火温度要多摸索摸索。这个我还真没做过，知识经验之谈，希望会对楼主有用。

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lansedecao

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藤椅

发表于 2012-12-30 08:44 |只看该作者

还是很谢谢zb_ming
, g6 y6 q0 `9 C- p; e1 C* A
我设了温度梯度，去P 大脑提取物反转的CDNA，不管哪个温度都P不出来啊

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