分离PBMC时的疑问？

easternliu

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2 o6 d2 q1 x6 g9 `" r8 ?/ A/ s' K; ]
sorry，不是针对你，我是指“不会的”这三个字，操作问题也是问题，说不定就是楼主遇到的问题哈。对于新手而言，谈常识有点过了。

easternliu

回复 pengxuleo 的帖子, [6 @; f3 l7 n8 ]( ]2 [& l+ |( H% U1 A
' }8 r/ ^& u, `/ z8 M$ z
大侠顺便帮我解决个问题吧http://www.stemcell8.cn/thread-64671-1-1.html

pengxuleo

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# P6 Y- g* v5 L; ~$ ]+ v. k( b0 ?! P5 i& E7 `% T
好吧，那我以后回答的时候，写详细点。以后多交流啊

天天天雨雨

若觉得有影响，可以先只吸取明显的白膜层放入一个离心管中，然后下层若有较浑浊有细胞可以单独放入另一个离心管中一起离心，, }- {9 l6 p! l) B: n
我们这样做过，有时候下层的淋巴层有不少细胞，有时候很少便弃掉

cheeray

扩大洗涤液体洗涤。。。你可以多用几只离心管。 这样可以多收集细胞。。。

ljl1988115

这种情况可以适当增加一下离心机的转速

spring1221

回复 gengtongyu521 的帖子2 I" ]! e8 }$ q! `  Q; X6 L7 Z
( F. w( K0 E/ ]9 R  c5 N( p% |
除了用PBS洗，用盐水或者1640洗可以吗？

wwxx66

不充分混匀肯定离心效果不好，吸白膜层时尽可能将白膜层洗干净，将白膜层吸出后加入到生理盐水或PBS中，离心前上下翻转一下离心管使其充分混匀，然后2000转，8-10min就可以避免细胞的丢失！+ n* h9 B( {9 O7 W& e; N) q
你可以将上清液再次倒入新的离心管中再次离心看一下，我就尝试过，混匀充分后，不存在细胞的浪费！

joe_binyang

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5 r$ F  p" n: P9 u& K9 N  x
2 ~6 `1 Q' c0 ~2 ~7 {充分混匀稀释液是必须的，分离液是水性的，只要混合充分，一定能溶解扩散，不影响效果

cheeray

如果你怕收集不全。可以收集时多加几个管。