分离PBMC时的疑问？

easternliu

回复 pengxuleo 的帖子4 f5 s! i2 K8 q* O$ \- n
7 p  R6 z; M5 R. e/ {
sorry，不是针对你，我是指“不会的”这三个字，操作问题也是问题，说不定就是楼主遇到的问题哈。对于新手而言，谈常识有点过了。

easternliu

回复 pengxuleo 的帖子& j# |5 g% b; R
/ ~4 U2 F% v' @$ Q
大侠顺便帮我解决个问题吧http://www.stemcell8.cn/thread-64671-1-1.html

pengxuleo

回复 easternliu 的帖子: O. V+ U" |3 ^% l9 K  `, k; `
0 I. i" B, p" z" J
好吧，那我以后回答的时候，写详细点。以后多交流啊

天天天雨雨

若觉得有影响，可以先只吸取明显的白膜层放入一个离心管中，然后下层若有较浑浊有细胞可以单独放入另一个离心管中一起离心，  f! O- Q$ U6 h" N" S# d
我们这样做过，有时候下层的淋巴层有不少细胞，有时候很少便弃掉

cheeray

扩大洗涤液体洗涤。。。你可以多用几只离心管。 这样可以多收集细胞。。。

ljl1988115

这种情况可以适当增加一下离心机的转速

spring1221

回复 gengtongyu521 的帖子
: B0 w2 [3 O6 ^% J1 V* r9 r
! D* P9 \  N# p/ S. S( H除了用PBS洗，用盐水或者1640洗可以吗？

wwxx66

不充分混匀肯定离心效果不好，吸白膜层时尽可能将白膜层洗干净，将白膜层吸出后加入到生理盐水或PBS中，离心前上下翻转一下离心管使其充分混匀，然后2000转，8-10min就可以避免细胞的丢失！. [. U/ f: W4 }2 R. w: C
你可以将上清液再次倒入新的离心管中再次离心看一下，我就尝试过，混匀充分后，不存在细胞的浪费！

joe_binyang

回复 gengtongyu521 的帖子6 J7 [3 T' o1 v- S

! q) ]" C1 l# d2 O. D充分混匀稀释液是必须的，分离液是水性的，只要混合充分，一定能溶解扩散，不影响效果

cheeray

如果你怕收集不全。可以收集时多加几个管。