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求助~~肿瘤组织抗原的提取？？？ [复制链接]

hwlightning

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楼主
发表于 2013-2-21 14:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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肿瘤组织抗原的提取方法？* ~6 o& Z0 \2 y- K
浓度是怎么检测的？刺激DC需要加入的量是多少？
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easternliu

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沙发
发表于 2013-2-21 15:03 |只看该作者
七次方个细胞100ulPBS，液氮反复冻融4、5遍，加PBS，离心取上清
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藤椅
发表于 2013-2-21 15:20 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子% b! I& k9 n. Y8 ?0 E' B- t

5 i3 ^3 z' Q6 U# j" n) T是用机械法取细胞还是酶消化法？刺激DC时加入多少量了？
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easternliu

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板凳
发表于 2013-2-22 09:34 |只看该作者
回复 hwlightning 的帖子
! q- m. D1 x" y3 a' ^( k; _( C6 v. F4 [" Z
消化都可以的，完了用PBS洗两遍再重悬，加多少量我不记得了，貌似加的不多。你还是买肿瘤抗原吧，市场上有的卖。
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hwlightning

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报纸
发表于 2013-2-22 09:40 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子
! t" v8 z+ k; h' p5 ~0 @5 _$ b. d1 e6 c, n1 g
多肽吗？贵不贵
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kyo000

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地板
发表于 2013-2-22 09:52 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子1 }% T3 @6 M. K

: g9 c7 x' {, l为什么我用消化法得到的细胞很少？用的是加EDTA的胰酶消化，消化完后直接过滤，PBS洗一遍重悬计数
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easternliu

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7楼
发表于 2013-2-22 09:56 |只看该作者
回复 hwlightning 的帖子
% U. Z3 C' V3 Y* m
% t3 D% t! Z" A! \7 T8 D嘎嘎，没买过。查了一下，是加1ml pbs离心然后加100ul就行了
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easternliu

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8楼
发表于 2013-2-22 09:58 |只看该作者
回复 kyo000 的帖子3 ~- @# G; P$ V9 c) T
1 x+ y. Z( R" ^5 C) R
不知道你说啥。消化得的细胞少是啥意思。然后过滤是过滤什么。然后又计数。。。
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