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[讨论] 细胞代数问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-2-28 08:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:冻存与解冻的过程,对细胞代数有影响吗?细胞代数是怎么回事呀?谢谢前辈指教!
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沙发
发表于 2013-2-28 09:39 |只看该作者
如果你冻存的时候是p1代,那么解冻的时候就是p2代
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藤椅
发表于 2013-2-28 09:45 |只看该作者
一般来说,消化并传代一次算作一代。3 {6 r4 F3 _- l+ B
如果是P1代的细胞消化后-冷冻-解冻-接种。应该就是P2
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

板凳
发表于 2013-2-28 10:51 |只看该作者
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代数按传代次数定义的,一般来说,你需要将前几代的细胞大量扩增然后冻存几十管液氮保存起来,随着传代次数的增多,细胞系可能在传代过程中发生这样或那样的突变,时间久了跟第一代的差异可能会差异极大,所以你尽量大量冻存,以后复苏只用前几代的细胞。另外一个细胞系,你养了两三个月就该丢掉了。为了保持稳定性,不需要冻存放起来了。
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报纸
发表于 2013-2-28 11:15 |只看该作者
体外培养的组织或细胞与体内相比仍然存在着较大的差异。因此,当组织细胞被置于体外培养后,失去神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的环境中,日久天长,细胞形态和功能都会发生一定程度的改变,即体内、外细胞存在差异。细胞在体外培养时间越长,差异越大。体内、外细胞的差异关键在于细胞的分化。9 f7 @+ C# G$ g) F* f8 |0 o) Z
体外培养细胞分化变化表现:1、不适应,即细胞失去原有组织结构和细胞形态,分化减弱或不显,是由于环境的改变而出现的变化; 2、 脱分化或去分化,即细胞失掉发生分化的能力,可能是基因变异所致。
/ c8 ?6 X# S2 t7 D# I9 c  I
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地板
发表于 2013-3-1 08:01 |只看该作者
也就是说,冻存细胞使细胞停止分裂停留在较早阶段,与它固有特性最相近;而体外培养的细胞经过多次分裂后就会离最原始的形态功能越来越远。我要做的也应当是在细胞最初的状态下完成自己的实验吧,感谢大家帮我理清了思路,抓住了问题的关键!
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发表于 2013-3-1 08:48 |只看该作者
zpzp0312 发表于 2013-2-28 09:45
% K4 @7 A- y) n1 _一般来说,消化并传代一次算作一代。: N7 n' Y$ \  n/ }1 v. ?3 v) R$ a
如果是P1代的细胞消化后-冷冻-解冻-接种。应该就是P2

* h. r& c8 [8 F$ E& A: k如果我分离后就冻存了,复苏后要算第几代呢?8 U+ q* K  B* E" b3 }) U; J; `
因为实验室条件有限,所以我们分离出来就冻存了
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发表于 2013-3-1 09:16 |只看该作者
原代分离算是P0代,直接冻存要保证细胞数量充足,否则复苏的P1代细胞可能活性不好,或者数量太少生长不起来。
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发表于 2013-3-1 10:32 |只看该作者
回复 硕果累累_555 的帖子
$ G# K+ z4 \, q  O; A5 |) R8 l+ X- ]4 O
哦,当时时间和紧,有些条件也不具备,所以分离后只能先冻存了
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优秀会员 金话筒

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发表于 2013-3-1 13:01 |只看该作者
回复 willow0711 的帖子- k% ^" c, l1 Y5 y3 t
3 n# Q) c, y7 f3 z4 h. w$ }
原代是P0
6 h) Z4 D3 Q0 S$ @# {复苏后是P1
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