关于NK的讨论

ljl1988115

不知有没有做过NK细胞的同学，不知道大家是怎么养的？希望做过的同学能解答一下，我看文献上有用滋养层细胞的，不知是什么情况，有做过的讨论一下吧！

wwxx66

国外做的很多都是用饲养层细胞养的，K562细胞经基因工程改造，可以表达一些膜分子，在膜分子的的作用下，NK细胞可以大量的增增殖，最大扩增倍数可达到21000倍！国内也有很多专利讲到这些东西。你可以去国家专利局网站上查找。

weijunning

可以不用饲养层；选用德国产的一种用于NK细胞培养基（比较贵，2000元/瓶，500ml/瓶），选用关键细胞因子IL-2，OK432，可以进行很好的NK细胞培养。

永远的伊凡

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( |) P% A; I" m0 I% I: b6 x
8 H- ^- P3 ?8 j- q能不能讲具体点呢，像需要加的因子的量、加的时间先后等等

yangpan521

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- A9 q. k" i5 E; d# N
% `0 H- K# d& c( H; k能不能发一些相关的信息呀，比如饲养层的选择、因子的浓度等 最好有相关的文献 谢谢

weijunning

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* s8 L1 d- @% t) i, Z( v( A2 {( ?$ q- J- d
OK432有配套的溶剂去溶解，1g用一支配套的溶剂去溶解就行，配出来的是1000X母液；需要铺细胞当天加；IL-2的工作浓度为1000ug/ml  在当天加；之后扩瓶培养基只加IL-2因子就行。

永远的伊凡

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  l4 i0 |8 b" S- _6 |, ?# d/ H) s2 H
很有用，谢谢！

zhenhuale

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我用德国的培养基和OK432都试过培养  有文章也报道过该种培养方法
. O' I9 {( W/ I5 f但是培养效果不理想，请问您培养多少天可以得到多少的细胞量，CD3-CD56+比率多少？谢谢！

weijunning

回复 zhenhuale 的帖子# k- K2 ~# e: T- E# f1 N

# b$ A# \- k4 q我们正是用此方法培养的NK。一般在第10天才开始进入快速增殖期，之前增长比较缓慢；由于其对数生长期滞后，回输我们定在第15天，这时细胞数能达到2.0X109左右。CD3+CD56+一般在35%左右。

ljl1988115

回复 weijunning 的帖子0 Z0 j: w5 x+ W* \# B! l

0 P3 u# p, w" c9 w/ }( k' ANK的表面标志抗原应该是CD3-，CD56+吧，双阳的话不就是NKT了吗