跪求脐带间充质干细胞分化鉴定方法步骤，急急！！！

iytbxxg

要做脐带间充质干细胞分化鉴定，不知从哪里找实验方法和步骤，求各位大侠把相关方法步骤赠送，在此跪谢了！！！

jack1381818

暨南大學學報醫學版 2009 第4卷 p367-372; b  z; k( O- C2 ?. ~
http://wenku.baidu.com/view/2d1cbc8b6529647d2728521d.html
: m0 `0 g0 Y$ e7 Q: z5 H或許有想要的

iytbxxg

还可以，还在学习中，多谢

细胞海洋

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: G0 X0 t. G2 G2 k! `% b. h
6 _/ g$ @$ p+ C5 ohttp://www.stemcell8.cn/forum-34-1.html

wuhuaguo88l

这篇文献也许能提供一些帮助

edwardellen

分化诱导基本就是换成条件培养基培养，之后做染色鉴定。; t* L# I5 d) W3 @* s! [
(1)诱导向成神经元的分化
9 M. D6 z! ?: |用含有3mmol/L β-巯基乙醇、5×10-7mol/L视黄酸（RA）的DMEM/F12预诱导24h，再用含5%FCS的DMEM/F12培养7d左右，检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达。
1 ^/ `1 L" ^& W& b- a(2)诱导向成肌细胞的分化" b1 P. P1 x: U' t7 w. J/ G
用1×10-4mol/L 5-氮杂胞苷诱导24h，然后用含有10μg/LbFGF的无血清DMEM/F12诱导2周左右，检测肌动蛋白actin 的表达。
* W$ [) `# b  J* M- I5 _(3)成脂诱导分化及油红O染色. o- S$ i& T6 q+ G8 b! Q: u2 l
细胞融合达70％时，去掉原培养基，PBS洗涤1次。以含有浓度为1 μmol/L地塞米松、浓度35 nmol／L胰岛素、浓度200 μmol/L吲哚美辛和体积分数为5％FBS的H-DMEM向脂肪细胞诱导，每3-4 d换液1次，观察到胞质中有脂滴形成时，吸去培养液，PBS洗涤2次，体积分数4％多聚甲醛固定15min，以质量分数为0.375％油红O染色20 min，苏木素复染2-5 min，显微镜下观察、拍照。1 E( m; I  q9 q9 p$ ^: y
(4)成骨诱导分化的形态变化及碱性磷酸酶染色
1 ^/ s, D2 K( G, l# r" u细胞融合达60％时，去掉原培养基，PBS洗涤1次，以含有浓度0.1 μmol/L地塞米松、浓度10 mmol/Lβ-磷酸甘油、浓度50 μmol/L抗坏血酸和体积分数为10％FBS的DMEM/F12向成骨细胞诱导，每3-4 d换液1次。诱导3周后，吸去培养液，PBS洗涤2次，体积分数95％酒精固定10 min，水洗数次，放入碱性磷酸酶染色剂中，孵育4-6 h，自来水冲洗数次，质量分数2％硝酸钴反应5 min，质量分数1％硫化铵反应5 min，蒸馏水冲洗。显微镜观察，拍照。