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楼主: hofo336699
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请教脐带干细胞问题   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

11楼
发表于 2013-4-10 11:36 |只看该作者
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8 W+ `* X! X/ h# q( E2 I
& r1 Y. s4 x8 X0 ~+ u/ N我们的脐带是用组织块法培养,LG-DMEM和FBS(Gibco澳洲产),半量换液,P3后测流式,大多数CD34阳性,包括均值也是阳性,共测六种标记物,间充质标记物表达为阳性。
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12楼
发表于 2013-4-10 12:17 |只看该作者
我们的培养方法和你们的基本都一样,培养基和血清也一样,原代培养的时候是少量加液,P1~P2视情况而定,悬浮杂质(死细胞,微小组织块等)太多的话,基本都是全换!一般3天即可传一代,我们测了8种标志物,CD14、34、45,HLA-DR,CD44、73、90、105,前四种都在1%以下,后四种都在99%以上
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小小研究员

13楼
发表于 2013-4-11 12:11 |只看该作者
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( G: ?9 o- o0 s, P5 d( p+ }( w: |% Q. ?* g1 g8 `& B) [: N
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
, M3 m3 p: z1 h2 }+ q5 b( `1 P1 f6 c8 z$ ^5 u. `& V
否则他会看不到

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14楼
发表于 2013-4-11 14:32 |只看该作者
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) P/ e0 y" c! h9 G7 x: h" L% z/ c! n5 _5 E3 G1 k+ ~
好的,谢谢提醒!

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15楼
发表于 2013-4-11 14:32 |只看该作者
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$ r! a1 f) y1 ]4 M
1 `9 g8 q5 V( n( `) b1 ^我们的培养方法和你们的基本都一样,培养基和血清也一样,原代培养的时候是少量加液,P1~P2视情况而定,悬浮杂质(死细胞,微小组织块等)太多的话,基本都是全换!一般3天即可传一代,我们测了8种标志物,CD14、34、45,HLA-DR,CD44、73、90、105,前四种都在1%以下,后四种都在99%以上 3 I  o1 ~+ m# q; }  K/ M, i
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

16楼
发表于 2013-4-16 03:59 |只看该作者
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2 V/ _# A* E. U; O3 C  k! _# S& z5 Q6 q+ l" K3 [
不可思议!CD34+是不应该出现的,这是脐带MSC优点之一。几种可能:
* O7 n3 A. r, R- \; C, Q1. 试验方法:抗体是否正确使用?
$ s0 J) U, R- n9 Y0 X2 A) ?/ n2. 内皮细胞污染
. \$ a9 ]" ^2 \* b4 E3. 血液中内皮祖细胞污染3 b5 u8 T2 r+ q* V7 l+ K

, R, B: M  O' ^即使有后两者污染也不应当这么高。请楼主发照片出来,大家帮你看看。+ i7 R- L' s0 A
5 r( @$ c8 Y$ |0 X( `
祝好运!
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