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' V' w. \1 L d. L多聚赖氨酸玻片如何处理?
* m1 r+ n: ?. O5 w% Z$ }. f 多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:& j& K+ C1 u$ e1 z
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(1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。+ o7 R% a# Z5 Y: a0 p# t f0 B
& {( y7 {9 ^* W! B. T/ {0 A (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。9 v# {( R& Z8 k" B
0 V7 f3 v8 Y4 n8 k1 s5 ~5 W" ?2 x8 u (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
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(4)取出后放在无尘的地方晾干。, O5 m, o$ E6 C2 o& J! F
) V; L( T3 @4 ^- d; K( } (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
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& N9 g# H+ k3 h; L [* n/ n (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。
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(7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。! ]0 [! L. o: Y+ N2 T! P/ g4 `- x
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固定的原理:
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( Z- \' l: w$ ]; q' u" G+ y* ] 细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
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