干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 34121|回复: 7
go

急请教防脱玻片 [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
326 
威望
326  
包包
713  

优秀会员

楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
0 M* Y- W6 a6 @9 [3 z. [# m& E
& |0 ^5 j6 v: x请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1250 
威望
1250  
包包
219  

金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者

' V' w. \1 L  d. L多聚赖氨酸玻片如何处理?
* m1 r+ n: ?. O5 w% Z$ }. f          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:& j& K+ C1 u$ e1 z
: ]5 Y+ R8 ^* Y5 y  a
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。+ o7 R% a# Z5 Y: a0 p# t  f0 B

& {( y7 {9 ^* W! B. T/ {0 A        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。9 v# {( R& Z8 k" B

0 V7 f3 v8 Y4 n8 k1 s5 ~5 W" ?2 x8 u        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
8 d! i# x; ~' O  P+ P$ X) x7 \6 X7 [$ m
        (4)取出后放在无尘的地方晾干。, O5 m, o$ E6 C2 o& J! F

) V; L( T3 @4 ^- d; K( }        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
1 ?/ C" Q$ ^# w) Q
& N9 g# H+ k3 h; L  [* n/ n        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。
: R* ^( r& K9 B$ s# C* Z  W$ x
        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。! ]0 [! L. o: Y+ N2 T! P/ g4 `- x

1 p% ?: p* Y( K* d+ ^5 S
6 b8 P) D% i2 g2 q. ~$ H# u7 Z8 b& T
        固定的原理:
0 J" ]" w% x3 O$ }5 Y+ e* V
( Z- \' l: w$ ]; q' u" G+ y* ]        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 4

积分
1250 
威望
1250  
包包
219  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

Rank: 3Rank: 3

积分
657 
威望
657  
包包
282  

金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
326 
威望
326  
包包
713  

优秀会员

报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑
! O, ^  e1 M, ^2 o0 i* ^1 p0 U, e6 @9 G4 B2 V3 A4 g$ [
回复 wf78365421 的帖子& @  O0 j! k; X0 |- X
$ Y6 \+ b' ?# A  S( R
谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3650  

小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子
8 D8 C2 {4 L  J
9 c/ L6 W6 B8 u- o1 k  H. x你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样) q  V/ x* _2 d* v  ~
  o) b$ J( ^$ r  p
否则他会看不到

Rank: 1

积分
42 
威望
42  
包包
255  
7楼
发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
42 
威望
42  
包包
255  
8楼
发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-9-27 19:02

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.