干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 23111|回复: 4
go

[请教] 请教一个荧光定量PCR的问题 [复制链接]

Rank: 2

积分
208 
威望
208  
包包
759  

优秀会员

楼主
发表于 2013-5-29 15:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位大侠,大家做荧光定量PCR后得到的扩增产物还需要跑电泳吗?如果跑,目的是什么,能定性地分析基因表达量的变化吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
74 
威望
74  
包包
692  
沙发
发表于 2013-5-30 09:47 |只看该作者
可以跑电泳,但是一般来讲qPCR的扩增产物都不到200bp,条带太小,没必要去跑,除非你对自己定量的结果很怀疑……
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
469 
威望
469  
包包
864  

金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2013-5-31 08:14 |只看该作者
结果不理想时作为验证吧
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
155 
威望
155  
包包
472  
板凳
发表于 2013-5-31 09:46 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 ind6562 的帖子1 y/ O- |# F: Q. `0 v' L

- t8 ?" O# N8 L+ x( V跑电泳只是个参考,差不多属于半定量,跟你算出来的结果不一定一致。因为倍增是根据CT值算出来的,是个起始值。pcr到最后差不多都到达了一个平台期,跑出来的条带其实有时候差别不明显,除非有表达和不表达的。假如设置的循环数比较少,在到达平台期之前收集的PCR产物,定量则有一定参考价值。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
150 
威望
150  
包包
773  
报纸
发表于 2013-6-4 14:58 |只看该作者
一般都不跑$ I! F' o" J9 [3 U
不过最后先放负二十冰箱,等分析完数据,再做处理。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-3-19 04:51

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.