每10ml血你能提多少PBMC

easternliu

我一般40ml血提1.5-3.7*10^7的PBMC，听说别人每10ml能提1*10^7，大家一般能提多少哇

fengxiwu

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# d& _5 N/ _9 i. o9 A: \% X     我做的是白血病实验，需要分离骨髓单个核细胞（BMNC)，梯度离心进行了不下20次。
) B) O. t' H$ T# U    非白血病人的骨髓1-2ml分离的BMNC不超过10*7，而白血病人的骨髓1-2ml最多可以分离10*8到10*9 BMNC，治疗后的分离细胞数量同非白血病人样本.  V/ S8 q" _/ _3 F5 Y
      外周血的梯度离心也做过几次，7ml血液大都分离MNC 3-5×10*6左右。（非白血病）
+ }6 A1 Y* K8 X3 C3 k3 E; h% u$ }    外周血同骨髓相比MNC密度几乎差一个数量级。* |0 u. d2 t, s! O; h* @! b8 X
   

meister

一般1*10，6次方/ml

meister

一直很少的话，是分离方法有问题。偶尔少是样本的问题。

easternliu

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* D4 G( y% Z3 e% N" M2 M: Z6 @1 n% a1 D, F0 r" o
做了不少了，一直没这么大的量分离出来，10^6/ml这个量只有才做过一次脐血时接近。求教，分离哪些不易注意的细节，感激不尽

fengxiwu

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- R6 p6 ?" Q* D$ m/ W7 J4 \# [1 N8 X# g- t/ D
样本可能有个体差异，因为血液中的细胞比例是动态变化的，分离的单个核细胞包括了单核细胞和淋巴细胞，也只能是分离到其中的一部分，回收率不可能达到100%，如果按50%算的话，你看你能分离多少，而且，分离之后的洗涤离心也是会损失一点的。

easternliu

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) ?2 }# [6 y  ^: B/ C, ^1 M; R1 A% U做得不多，所以有些细节还不是很清楚

xiaostou

ficoll对细胞数得到多少很关键，选进口的吧

fengxiwu

回复 xiaostou 的帖子8 N4 C+ w. _! j# S
% M/ J7 a7 n! M" W2 g! Q/ v# _9 w
国产的物美价廉，淋巴细胞分离液没有什么高科技的东西吧，不就是个密度梯度离心吗，为什么一想到的试剂都是国外进口的呢。细胞因子，荧光抗体，国内的如果质量上不去，他怎么提高销量，本来就够便宜的了，如果不提高销售量，哪里来的利润？我们中国人都不支持自己的产品，还奢望他人 的支持吗？要让别人尊重我们，我们自己首先要尊重自己！

meister

; k/ S' N5 d* g' Y. F3 E$ {
9 s" S  [) X5 U$ k回复 fengxiwu 的帖子( K) n: }6 B+ J4 l% O

) g, p+ k; t, T: e5 {# O3 y国产的我试过了， 不稳定，效果比进口的差不少。有时低40-50%