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楼主: prince
go

请问怎么在镜下区分ES细胞和feeder?   [复制链接]

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发表于 2013-7-18 10:17 |只看该作者
差速贴壁法对状态不好的细胞有影响,减去feeder的数量比较好。
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优秀会员 金话筒

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发表于 2013-7-19 23:17 |只看该作者
回复 prince 的帖子5 ^% i4 e) [9 N5 x. W

$ i+ _. M) u0 a+ _) }3 t你差速后再离心,加新的培养液重悬,计数。密度不能太低,不然计数还真不准,最好数量级达到5或者6 次方。
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发表于 2013-7-20 12:26 |只看该作者
用胶原酶IV,它可以消化ES细胞但不能消化feeder。加入此酶,37℃培养箱内消化30min,镜下可以观察到飘浮的ES细胞,但feeder仍贴壁。此时可将细胞悬液吸出计数。
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发表于 2013-7-20 12:34 |只看该作者
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若吸出的细胞县液中细胞成团,可吸出后轻轻吹打成单细胞再计数,胶原酶消化时间虽长,但可以很好地避免feeder干扰~
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发表于 2013-7-24 15:26 |只看该作者
看形状就很好区分,feeder是条条状的,ES是不规则圆结团的,你以后铺feeder后,接种ES前后多看看就能区分了,或者用绿色光的显微镜看,会更清楚
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