请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

Ivan0108

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这个与操作有关的；培养基久置成分会聚集在瓶底，每次使用前摇匀基本就不会产生这种絮状物了。 我们实验室之前也有几个同事操作不注意产生这种，后来我提醒他们了基本没产生过了。
$ b) k* t. _4 ?% W8 ^8 }& N0 C  你也可以试下

cjsbaicai

你有没有加自体血浆，有患者的凝血检测单吗

baby00000003

采完细胞以后，或者采血以后，样本放的太久了（24h以上）才开始做培养实验就会有絮状物，可能会影响T细胞活性

lyj-0017

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! y, Q: ~; L$ }: c; L' B' a. M9 z1 S
: `/ G: @7 l( h没明白你的意思，培养基久置？是培养基成分聚集在瓶底？还是细胞会聚集在瓶底？

Ivan0108

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. {+ Y) n% K! K# a: W1 I. X
; L" p, X- X. F6 y5 H6 S# z$ B新开封未使用的培养基

zhl_8745@qq.com

我觉得应该是死细胞太多了以后聚团引起的吧，经常碰到，有的时候聚在一起像一条棉线一样，我之前是把它吸掉再继续培养。细胞生长才变正常的。

wangqs1818

抗凝剂用的是枸橼酸吧，枸橼酸抗凝的原理是拮抗钙，使用的培养基内含有钙，中和的枸橼酸的作用，产生的纤维蛋白原凝集，可以在细胞分离后加入肝素，作为后续的抗凝剂。另外如果你使用人源血浆作为添加物的话也可能出现这样的现象，都可以使用肝素一起解决

zhouyuchuan1990

我们实验室以前经常出现这种情况，一直在寻找答案，问过同道，分析有两种原因！: J7 X4 K" G: k' j) G  @. x
第一，血清（56度灭活血浆后，离心去除纤维蛋白原）浓度太高，一般细胞培养的血清浓度在5%，若超过此浓度，如10%左右，培养箱放置一晚后，整个培养瓶内就会形成胶冻状，继续培养，胶冻状逐渐解冻，期间可产生棉絮状，跟你的图片相似。
# L; T& d' o& F! S7 q; ]$ @3 J3 N$ W7 B  {第二，细胞损伤可产生棉絮状，如移液时过分粗暴，损伤细胞，甚至将贴壁的DC细胞吹落，剐蹭掉，就会在转大瓶或者转带后形成棉絮状的东西，镜下观察多是一层或一团死细胞，细胞之间由一种类似于胶原一样的物质连接，看起来像是春天水边的青蛙卵！

cjsbaicai

& h( Z  \6 y1 K- w9 o" ]3 M9 y* Z  M# r' {0 v
楼主出现的絮状物是纤维蛋白原的凝集，这种情况有两个方面的因素：1. 是患者体内的凝血酶原的浓度较高；2. 灭或血浆的时候，应该延长灭火时间，在一定程度上可缓解这种现象的出现。但主要来说，是和患者体质有关。
! X' u9 r) s, ?7 Z8 k6 ^3 L. I6 z; f3 H7 _" A4 K

cheeray

正常的细胞透明，圆滑。很漂亮。。