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[请教] 真核表达载体构建问题 [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员 新闻小组成员 帅哥研究员

楼主
发表于 2013-9-11 21:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
(构建一个载体准备通过同源重组插入到基因组中表达目的基因)真核细胞自身promoter后面加其他基因的CDNA,两者的连接处多了一个酶切位点(6bp),会不会影响后面基因的表达?还有是不是要考虑kozak序列会因为多出来的酶切位点被破坏呀(会影响后面基因的表达)?6 k  s. x  L. m/ z
是不是做好要做成无缝连接这两部分呀。
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沙发
发表于 2013-9-11 21:59 |只看该作者
会影响的,看一下分子生物学教科书
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藤椅
发表于 2013-9-12 02:34 |只看该作者
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" [) `- e  B, @" K) `% n: K$ j& Y3 O4 e3 m" M! [% ?2 O2 U" p
建议插入的cDNA把kozak, ATG都包括进去, 减少意外情况
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2013-9-12 12:37 |只看该作者
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应该没有影响的,kozak 序列需要加上,
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报纸
发表于 2013-9-12 15:01 |只看该作者
回复 neuralstem 的帖子
5 z: H! H5 f/ R6 Z" O8 j
; d0 [* P9 R; w" J9 {# O谢谢
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