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查看: 12145\|回复: 4	go [请教] 真核表达载体构建问题 [复制链接]

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金话筒优秀会员新闻小组成员帅哥研究员

楼主

发表于 2013-9-11 21:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

（构建一个载体准备通过同源重组插入到基因组中表达目的基因）真核细胞自身promoter后面加其他基因的CDNA，两者的连接处多了一个酶切位点（6bp），会不会影响后面基因的表达？还有是不是要考虑kozak序列会因为多出来的酶切位点被破坏呀（会影响后面基因的表达）？
是不是做好要做成无缝连接这两部分呀。

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沙发

发表于 2013-9-11 21:59 |只看该作者

会影响的，看一下分子生物学教科书

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藤椅

发表于 2013-9-12 02:34 |只看该作者

回复 hyde 的帖子' U* [7 @/ y) ~7 }

建议插入的cDNA把kozak, ATG都包括进去，减少意外情况

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金话筒优秀会员

板凳

发表于 2013-9-12 12:37 |只看该作者

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应该没有影响的，kozak 序列需要加上，

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金话筒优秀会员新闻小组成员帅哥研究员

报纸

发表于 2013-9-12 15:01 |只看该作者

回复 neuralstem 的帖子2 {0 N$ K V& v6 V2 c

谢谢

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