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[讨论] 培养基的PH值会对HES的状态影响吗?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-9-21 15:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位战友,最近细胞传代的时候出现问题,考虑各种原因,测了培养基的PH值在7.5,后重新配置还在7.48-7.5左右,请问这种PH回对细胞的生命状态有影响吗,大家每次配置培养基 会不会测量PH值呢,请分享经验,谢谢
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沙发
发表于 2013-9-22 13:08 |只看该作者
配制好以后用1N HCl 调节pH
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藤椅
发表于 2013-9-23 10:33 |只看该作者
回复 feifangli 的帖子
( U' t2 J% G6 J% \' p
" X: Z5 s9 v" O1 W6 j6 R我买的直接就是gibco的knockout DMEM/DMEM-F12,你是说配好之后就直接检测,然后再过滤除菌还是怎么办?谢谢不吝赐教
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板凳
发表于 2013-9-24 10:15 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 qiushuiwuhen 的帖子9 ?5 S& E/ m3 }: E6 {. Q+ X
1 m: m( [' q2 V' \9 Z
我们买的粉末自己配置液体培养基,都是溶解后调节Ph,然后再过滤灭菌。如果买来是液体的,一般可以直接使用。
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报纸
发表于 2013-9-24 11:24 |只看该作者
PH和渗透压都会影响细胞的的生存状态~~
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地板
发表于 2013-9-25 09:10 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子4 Q: ]* j+ H) v) J, r' u

( ?0 C2 v/ P6 H9 Y/ ^- I2 S* P7 N你的意思是如果买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12,在加完各种营养因子之后还需要测下PH值,还是不用测直接用(上述试剂按照正常程序4度保存的)?谢谢!
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发表于 2013-9-25 09:52 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子( e$ q* R& R$ z" w8 x

9 L  Q: I% E% ^& ]5 T  A  H" H买来的一直用就行了,如果放置太久谷氨酰胺失效颜色就变粉了,细胞贵重的话就不要用了,会收影响的,如果自己配的话一定要调PH值得,调完了再过滤,还是买现成液体的吧,贵不了很多钱,省不少事!本来做实验就够累心的,还因为配药这种可避免的事操心,不值得。
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发表于 2013-9-25 11:36 |只看该作者
回复 luyue6453 的帖子
1 Z" \8 F" ?5 v9 ~
1 O. k% R4 H7 D+ C2 z3 x你好,我买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12成瓶的液体500ml,你的意思是在加完各种营养因子之后不用测直接用(上述试剂按照正常程序4度保存的)就行吗?一般1月那瓶500的就用完了?

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发表于 2013-9-26 09:24 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子
# ~7 q+ p, J9 K% a; F, Z! s
5 o4 b0 R/ A2 K8 p) Q+ B9 P! I瓶装的500ml培养基都是调节好PH、渗透压等因素的,所以在配制成完全培养基时,如果添加的东西量少,一般对PH什么不构成影响,可以直接用。当然,如果是比较娇嫩的细胞,条件要求苛刻的,还是测下吧。刚买来的DMEM/DME-F12是可以低温(2-8℃)存放一段时间,一两个月没问题,当添加了血清、生长因子等,尽量短时间内用完
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发表于 2013-9-26 11:29 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子
7 x8 S  r1 \0 N' V# F5 u/ [3 {
" I( c9 F5 J' d& m8 N! A我们在养HES的时候 用碳酸氢钠和氯化钠调节PH和渗透压,但是培养基是我们自己配的!如果市场上买,培养基添加物应该给你们调好了!
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