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楼主: bishengrong2013
go

大家帮我看看,给点意见,二代冻存复苏的兔MSC,看看细胞形态正常么?谢谢     [复制链接]

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发表于 2013-10-21 22:27 |只看该作者
回复 oucflora 的帖子
$ E6 i1 D/ q7 e# z# F4 p! e  Y
/ i+ P  C+ C' q) E4 c恩,好的,谢谢

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发表于 2013-10-22 08:39 |只看该作者
回复 bishengrong2013 的帖子# j' ]0 t/ u' c# }: J8 Y

8 \) o& I4 z8 z2 k' `具体的换算我不懂,但如果以离心力为单位的话,最好不要超过200g,时间应控制在5分钟左右。8 Z" @# {+ J5 `1 o  ]
另外,还应该考虑下其他因素对细胞造成的影响,比如试剂、处理时间、方法等等。
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发表于 2013-10-22 08:54 |只看该作者
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% I. v/ _0 z6 Q; b* j+ H) |9 i6 D4 n! J7 v2 f3 z( A
还不如继续养呢~  胰酶消化对细胞是有损害的!
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发表于 2013-10-22 10:09 |只看该作者
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看起来细胞量很少,有可能离心速度不够,要不就是中间冻存和复苏过程出了问题,导致细胞死亡率过高,一般复苏一两个小时候就可以看出贴壁率的,干细胞也不是说那么好培养的,好好想想问题出在哪吧
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发表于 2013-10-23 11:27 |只看该作者
细胞密度较低,不知道你们实验室是不是一直采用H-DMEM培养MSC,我们实验室在较早之前采用H-DMEM时,原代细胞长势很好,但是传代或者冻存复苏后的细胞状态很差,肥大、分化现象很是严重,所以改用L-DMEM或者a-MEM培养。
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发表于 2013-10-23 14:23 |只看该作者
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: M4 d7 g0 b/ S& l- W' w$ Y2 z  F: @* ^. ~1 ]. |
一开始,用的低糖的培养基,形态不好,之后就改为高糖了,帮我看看最新的帖子吧,那是最新的细胞状态照片,谢谢
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发表于 2013-11-5 14:49 |只看该作者
楼主,高糖培养基容易分化,长的慢的话看一下是不是培养基放置时间太长了,一般一个月为好
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