胎盘造血干流式有人做过么？

花饶然

本人对流式细胞仪的使用也是刚开始，很多疑惑的问题。从胎盘里提取的细胞很杂，但是不知道为什么CD34的量那么高，请问下有可靠的检测手法吗？本人觉得样品有问题，而且分析方法太粗糙，所以迷茫着，请高手指教！

老十

CD 34 表达量比较高是不是别的细胞，可以再试其它marker.

sdudai

我做过，处理后，流式细胞检测，CD34就是挺高的。

cantonchn

脐血的34+很低的~~~

coffee.cat105

我们也曾经做过，CD45和CD34双标，细胞做出流式来，在点图上完全不能成团，只能通过不断设门来取舍，CD34阳性表达是非常高，但是细胞的FSC和SSC跨度都很大，是细胞？还是别的什么？成分就很难说了。不知道楼主是不是这么个感觉？所以总觉得这个东西不是那么靠谱。

老十

有没有想过优化FACS 的protocol, 我最近也在做，感觉protocol 的影响也在，比如是否完全block 非特异性的蛋白。等等。希望大家都能成为流式高手。

zhouhuaxizhu

个人觉得对照应该设置齐全，包括空白的，通行对照再来看CD34的染色效果。最后肯定是要在多几个筛选marker了，毕竟单纯的CD34来筛选干细胞好像在严谨一点的杂志可能都不好通过吧。

花饶然

回复 coffee.cat105 的帖子" M2 @  f- J% W; [

. m' j+ u* Y$ ]' t6 ]谢谢分享您的经验，请问您做的阳性率有多高呢？我还弱弱的问一句，这个阳性率到底指的是占所有细胞的百分比呢还是把造血干群给分出来后，看CD34的在其中的比例呢？

花饶然

请问各位高手，除了该标CD34，CD45，还有哪些可以标的？文献上还有很多标CD38的

sdudai

胎盘中有血管，血管内细胞是上皮细胞，上皮细胞都有有CD34的表达，在从胎盘里面提取细胞的时候难免会掺杂有血管上皮细胞，所以这时候显示CD34的阳性很高，其实这是有一部分假阳性的原因。