求助：各位老师请指导：貌似IPS细胞培养过程中分化了

922922922

各位老师好，我的IPS细胞培养7天之后，感觉克隆的边缘不平滑了，开始出现不规则的形状，不再像原来的圆形。请问是IPS分化了吗？如果是，应该怎样剔除这些分化的细胞呢？请各位老师和师兄师姐不吝赐教！先谢过了

细胞海洋

建议上图

lipenix

机械法挑克隆传代，对细胞的损伤较小；或者IV胶原酶消化，时间短一点，分化的部分不会被消化下来。

zm19900508

回复 922922922 的帖子3 o) V# d; O; H8 ]3 i# u
" b7 P; t7 X* m6 z( T$ r- W
iPSCs 很容易分化的，是在2i里养的吗？

木木泥

如果有分化倾向的话不妨尽快传代  改善下生长状态。那些已分化的不能在传代后的干细胞培养基里生长 未分化的能在形成克隆

穿裙子的猫

) F/ F, Z, m, {+ g+ ~, m  W

$ J; z& J! E* D5 M* w" }5 P: Y7 S$ y回复 木木泥 的帖子
) ~7 U- A9 J& k; m$ i9 }4 R6 ?0 A7 h( t* z; p
我的好像也分化了，但是这些貌似分化的细胞可以在干细胞培养基里生长啊！
  w) ?7 L( j1 ~2 Q4 \3 K1 G3 h搞不懂了？过几天之后，这些圆形的细胞中间就会开始形成细小颗粒的细胞，立体生长。2 ?. {* v) ?4 Q7 a
我想知道我这是不是干细胞啊？

穿裙子的猫

回复 zm19900508 的帖子$ j% N! w' d$ e  j; @9 S" B7 x7 ~: L
' u" @% l% c- E- [) {# y' D$ S
我的一直都是在干细胞培养基中培养的，现在开始变黑，边缘有相对比较大的细胞了。你是怎么办的？

Emma1986

显微操作去掉边缘，保留正常形态的中心部分，继续传代挑选。

yiyi8909

边缘清晰明亮的先用记号笔标出拿枪析出

922922922

回复 yiyi8909 的帖子6 X7 m( w" ^4 o6 }$ E; E# \& z, H
9 y7 F  A6 v3 V8 Y* p/ B. B) Q
我们是在倒置显微镜下做的。请问您，是不是在培养皿的底部用记号笔标出，然后是在镜下还是不用在镜下，就可以用枪洗出来？ 期待您的回复,谢谢！