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楼主: lyj-0017
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CD3CD56双阳性细胞流式分析-圈门(附图)!!!   [复制链接]

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发表于 2013-12-13 15:31 |只看该作者
回复 rocfield 的帖子% T; g7 S2 ]2 q) t# d
. j7 Z2 ]0 r  W0 l
没有拍照片,所以还是想问一下啊,你在将单个核细胞加入75cm2培养瓶时,单个核细胞的密度是多少才不会出现2h贴壁之后悬浮细胞粘连的情况呢?
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发表于 2014-6-28 16:42 |只看该作者
回复 rocfield 的帖子5 a# k+ |& ^& S# U' @! j! K5 I
. U! E  B& |9 u; F9 a. X! N
看了你发的CD3CD56流式检测图发现你是用的CD3-FITC和CD56-PE两种荧光抗体,那么你们是如何调节补偿的呢?是直接用CD3-FITC单阳和CD56-PE单阳进行补偿调节吗?两种抗体都做过同型对照吗?
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发表于 2014-6-30 12:32 |只看该作者
两种抗体都做过同型对照。
, s* I, M; q' G6 U荧光补偿主要是用CD3-FITC单标记细胞来做,理论上应该是CD3-FITC和CD56-PE分别单标细胞来做补偿,不过一般情况下用CD3-FITC单标细胞调好补偿后,CD56-PE只需要微调一下,甚至不调,补偿也基本是好的。
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发表于 2014-7-1 10:27 |只看该作者
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回复 rocfield 的帖子
/ q  Z- @$ c$ U# w$ T) s% f- y5 f* s: f
3 ^4 X' Z! m# \# V5 N你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
1 ^% R8 ]* @9 L$ {' Q# G- |4 @, Z+ W) q
否则他会看不到

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小小研究员

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发表于 2014-7-1 10:27 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
- H/ L5 D" r1 k0 y* C
2 j7 y7 j& J* N* `  Q5 p# J看33楼

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发表于 2014-7-3 08:54 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子! z' c" x" c: D& f4 Z

1 Z$ f4 `' x* {6 I/ Q谢谢

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发表于 2014-7-3 08:55 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
: b9 }3 p  p% W* G5 ~1 G. |7 G% p9 }
两种抗体都做过同型对照。
' z" _$ D1 J3 S  _& `荧光补偿主要是用CD3-FITC单标记细胞来做,理论上应该是CD3-FITC和CD56-PE分别单标细胞来做补偿,不过一般情况下用CD3-FITC单标细胞调好补偿后,CD56-PE只需要微调一下,甚至不调,补偿也基本是好的。

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发表于 2014-7-3 11:16 |只看该作者
回复 rocfield 的帖子! ^$ `7 K/ O4 c) K& P$ S

: r3 e1 u* N/ g% Z4 `5 T; F: m' A. I为什么只用CD3-FITC来调节补偿呢?是因为CD56弱表达,CD56-PE跑到FL1通道的荧光少吗?
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发表于 2014-7-3 15:08 |只看该作者
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" I  e2 x$ d+ A5 @: F# G8 q# l3 {' M. V( n1 D1 R
这和CD3、CD56表达强弱无关,只是FITC和PE两种染料的特性有关。FITC荧光容易“漏”到FL2通道,而PE荧光较少“漏”到FL1通道。
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发表于 2014-7-3 15:47 |只看该作者
回复 rocfield 的帖子
4 `, w9 X2 c& A9 E: l
, B6 l' F4 @0 C3 d原来如此,恍然大悟啊,非常感谢!你们CD3CD56最高的有多少?最近做了一个达到40%多的
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