过表达Flag不表达 - 实验室综合讨论区干细胞之家

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楼主

发表于 2013-12-2 09:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

大家好，我用的是别人给的载体PCDNA3.1,带N端的Flag，他用的没问题。但是我的western结果 Flag在目的条带附近杂不出来，请问这是怎么回事？谢谢！我是做的DGAT2这个基因，预测了一下没有信号肽

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沙发

发表于 2014-1-21 11:17 |只看该作者

首先你要确定转染没问题，可以选用阳性对照，带标记的GFP或者其他抗体，验证转染效率没问题。其次WB的FLAG抗体有没有问题。然后就是你转染的这个质粒是重新提取的吗，还是别人提供的，质粒有没有问题？

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