CIK细胞污染

mtdj1314

回复 lyj-0017 的帖子; g; q9 y7 {& R! v- K& I

  g2 i$ P; B3 v$ u9 N' S接种后24h观察，培养液轻轻晃动有一层细沙状物质，怀疑是细菌污染，但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落？黑胶虫该如何去除呢？我使用的是自体血浆，只是没有经过56°C灭活补体，人体自身会携带黑胶虫吗？

lyj-0017

回复 mtdj1314 的帖子" g$ Q" S' g5 R$ f

3 g* g3 I6 p( F7 s! x1、你说的培养液经18小时培养是在平板中培养的吗？4 q+ A; [6 _7 N: R8 s
2、我们以前也遇到过黑胶虫，当时我们的老实验技师也说没有什么好的办法，现在也不知道有什么好办法。
7 I( ^: r  s( K3、既然用的自体血浆，为何不灭活补体呢？大家通用的方法你们为何不去做呢？再说也不麻烦啊。: C5 s2 b* s" Q$ `
4、人体自身携带黑胶虫这个还真不清楚，但是黑胶虫这个问题貌似也没有一个确切的说法说明其到底是什么。

mtdj1314

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( ?/ Z; ]* ]3 m/ e
" Y1 ], Z) \  w* F  i/ W是的，平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗？

mtdj1314

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" m% _3 z8 x; |# q0 H2 c& N! y, M1 I# V0 f
确实是比较棘手的事情呢，谢谢你宝贵的经验

ciweiyuan

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1 M0 f! |  Y9 C! b  C) _% y- V" n7 U+ z  R. ~; s5 w+ X: [! l( G, y, u# \
不客气，期望你实验顺利

cjq12862

除了楼上各位同行的推测，还有一个可能性：寄生虫污染，建议楼主立即找出污染源，环境消毒后重新培养。

lyj-0017

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. g( a( }$ O7 u2 l- v
$ q9 t5 {0 x0 g: z( r! Z不清楚灭活能不能消除黑胶虫。
( }0 s$ Z0 T! @- R4 t9 D另外，能否大体介绍一下你是如何制备外周血单个核细胞的？前期处理也不能排除

mtdj1314

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) s; q" F+ p! x/ q5 F& _& }# e寄生虫污染？可是两个标本是不同个体来源的呀

mtdj1314

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8 r0 g' @/ g- m. }& M
前期处理采用PBS稀释血液，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，然后再PBS清洗2遍，接种入培养瓶，应该是没有问题的呢

future007

做CIK治疗不是一般都需要第7天的时候送检验科做细菌培养和其他污染源检测嘛