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[请教] 用天津淋巴分离液最后离心力该多少啊   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-2-18 10:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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做单核时  最后离心收集细胞  用天津的分离液  离心力调600g  离心效果不好 离心后淋巴分离液很浑浊  回收率也只有10%  求各位离心大概多少
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沙发
发表于 2014-2-18 10:21 |只看该作者
也不一定是离心力的问题吧。你是选择缓升缓降的离心模式吗?这种分层的离心,如果用突然急刹的离心模式,也会导致分层不清楚。一般这个离心1500rpm应该够了,差不多200g左右吧
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藤椅
发表于 2014-2-18 11:43 |只看该作者
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6 s- }8 z& R8 `: g4 O' n& c: {  r( p4 [0 J
说明书建议400g,20min
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板凳
发表于 2014-2-18 17:36 |只看该作者
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2 Z. J; B8 K) @! k" ?0 z6 p. T8 b
% ~8 u1 A) X7 X. V& F. B600g  15min~20min
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报纸
发表于 2014-2-18 17:37 |只看该作者
回复 a52602589 的帖子
& {5 l, J% }; E- }/ G
+ Y$ Z1 [: l# J# |$ Q: b. l- D注意“减速”调制最慢的档!!!

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发表于 2014-2-18 17:38 |只看该作者
回复 a52602589 的帖子. f1 y3 S: d' ]- s# z# s0 P
+ m8 a' s, I& T  `8 ^) R9 G
往淋巴细胞分离液上加血时很重要,一定要保持界面分层!这样离心效果才好3 |# k& X- D! B8 E3 E8 x5 f; _
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7楼
发表于 2014-2-20 13:28 |只看该作者
1、说明书上说的是400g,所以你还是按照400g的离心力做吧。
) S' L3 O% n) ^- W! _2、淋巴细胞分离液的最适工作温度是20℃,所以离心过程中要注意控制好温度;还有就是如果淋巴细胞分离液温度太低,建议你提前复温。0 j! R5 U: j3 V" P; A; ?
3、淋巴细胞分离液上加上清液时,要缓慢补加,使得分从清晰。+ d- o6 c! p' W' l! ^! G0 t! z
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发表于 2014-10-16 14:28 |只看该作者
孙帅帅 发表于 2014-2-20 13:28
, _& z7 B; S4 Q8 o" }1、说明书上说的是400g,所以你还是按照400g的离心力做吧。
4 A$ X" G% d& O* g7 D2、淋巴细胞分离液的最适工作温度是20℃,所以 ...
. H+ J5 Q3 N7 p: F4 S7 f
孙帅帅同学总结得很好,再加上离心必须关闭离心机刹车几乎就全了。lz多实践一下吧,会好的。
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9楼
发表于 2014-10-16 15:07 |只看该作者
我们实验室2000rpm/min,换算一下,440g的样子。仅供参考
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10楼
发表于 2014-10-18 08:19 |只看该作者
第一:铺板要缓,不要打破界面。第二:升降速度控制,现在实验室是升5降3,主要是降速要很慢。第三:他说的400g,我们做过实验,离下来分层不好,离心力控制在600-700g 最好,时间20 min 。希望能帮到你
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