求助脐带间充质干细胞最基本的鉴定标准是什么呢？

龟酱

楼主第一次接触间充质干细胞，谢谢各位大虾。。

lidd14

. ~1 i' v- {: r' z4 C1 [! X0 K! R( |' i2 J
细胞表面抗原CD29、CD44、CD73、CD90、CD166阳性表达，CD34、CD45、CD31阴型表达，细胞贴壁生长，形状类似成纤维细胞。能成骨，软骨、成脂分化

viv

6 _# F& ^, L. q- t; ~+ g0 ]0 r% y- U6 E
ISCT Minimal criteria for defining MSC (Cytotherapy (2006) Vol. 8, No. 4, 315-317 ):
: P- S$ m- W" j+ h+ Y/ N' @1.  Adherence to plastic 6 q; U# V, _8 _: Y5 ?7 ]( `, v
2.  Specific surface antigen(Ag) expression  
$ N7 M/ s! s$ E$ ?1 `; H3.  Multipotent differentiation potential
2 O# f+ L. j4 r+ K+ q7 ]+ H  C7 M) S# U
鉴定方法：
& B) K% [/ R: `5 }: z. B7 p- v% F1、生物学特性：倒置显微镜下直接观察，培养瓶中的贴壁细胞为成纤维样，漩涡状生长
; x) h% J7 e) [+ r$ M6 _1 {4 H2、表面标记物（流式表面抗体）：阳性如CD29 CD44 CD73 CD90 CD105（不低于95%），阴性如：CD14、 CD34、CD45、CD31和HLA-DR阴性（阳性率不高于2%） & ]# |$ B! v; N) G* D+ k6 H' _
3、诱导分化：间充质干细胞成脂肪诱导分化、成骨诱导分化、成软骨诱导分化
2 g% X9 k4 D; |( d& n0 M! n$ i1 j4、成克隆性，把细胞充分稀释，然后放到培养皿里养，过几天形成克隆。& Q3 y# g) v% [8 f/ b

" E; L) C1 b- m具体步骤参见：
! F1 m; T( K8 E) c# vhttp://www.doc88.com/p-674409873150.html
- `8 j7 L& g0 jhttp://wenku.baidu.com/link?url=VDd5_2Xt7MZOHO0MU_igPLLq4UuvCM2o4ar7M7UV54iSZ10c_kPKEZjTO_3lnfoXjY28-_gN3BF27d5-8GyOvSrPOY7J7N30RqfIVPfC5Iy

龟酱

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" o' e2 b0 y, D# q1 y- z. N7 b- ]2 y* _
谢谢前辈指点~

龟酱

回复 viv 的帖子& j0 s( J; K( g/ k; x6 |
- s0 L( W: T/ w& `! J
感谢前辈提供的信息~

孙帅帅

1、表观形态学鉴定：一般认为体外培养的MSC细胞体积小、呈锁形、核浆比大。' w. U: b; S5 @" q. Q& L' A
2、流式细胞仪鉴定：不表达分化相关的细胞标志，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ形胶原，也不表达造血干细胞系的表面标志，如脂多糖受体CD14、CD34以及白细胞表面抗  原CD45等，但是表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和多种表面蛋白。
7 ~: @5 X, T0 n- Q: D3、功能学鉴定：MSC连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，而且保持正常的核型和端粒酶活性，但并不能自发分化，在体外特定的诱导条件下，MSC可分化为骨、软骨、脂肪等多种细胞。

龟酱

回复 孙帅帅 的帖子% T2 ]# w$ I' `6 k# [6 ~

% d: v0 F0 c* G5 t5 M8 L! m感谢前辈解答！

月_幻影

① 细胞形态检测
$ V4 r* P/ m8 c- i+ l  倒置显微镜下直接观察，培养瓶中的贴壁细胞为成纤维样，漩涡状生长。4 M6 w0 j+ G# P0 f* f9 d+ I, b
② 表面标记表型分析/ r! D) u. _, ~* |1 X9 c
  CD29、CD44、CD73、CD90和CD105阳性，阳性率不低于95％；1 x. Z$ m# ~3 O  _6 z; f
  CD34、CD45、CD31和HLA-DR阴性，阳性率不高于2％。
- b& \( h" t  l2 @  ]( A' T- m+ q③ 多向分化特性：在诱导培养条件下，细胞应能向脂肪、成骨分化。
. P8 x9 o8 F: F+ o
# h) S5 q0 {: |7 O: e, r2 r' ?# i

龟酱

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2 j9 e" o+ V" X4 A2 ]7 D3 r2 D* n/ a% n2 J) L) O/ h
感谢前辈解答~

半夏正微凉

请教下 阳性率不低于95%的阳性是怎么画门的啊