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细胞细菌污染之后有什么紧急补救措施吗? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-4-24 10:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
在建立iPS的过程中不小心细胞污染了,如果重新诱导又会花费大量的时间和资源,不知道各位高手是否有补救的好方法呢?难道只能扔掉重做吗?
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沙发
发表于 2014-4-24 10:19 |只看该作者
这个基本有很少的解决办法,不过我觉得你可以通过反复清洗,利用iPSC基本贴壁的原理可以洗去污染的细菌,然后消化后进行无限稀释的手段,把细胞稀释成几乎为100微升一个,接种在96孔板中,等待奇迹的将领:细菌被除去,iPSC通过一个细胞长成单克隆。
% x  G* _0 |. e% w0 S* K6 K! @/ s; }2 `5 e  P! m; q. r5 m) U
别问我怎么知道的,上面都是瞎编的,因为我要是细胞污染了,基本等于说重新再来吧:'(
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藤椅
发表于 2014-4-24 10:28 |只看该作者
回复 zhen022 的帖子- z3 B) E( f/ d* r/ X, z

+ w5 t3 b( L7 ?( d2 Q* \" F:L 不过还是谢谢你了

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板凳
发表于 2014-4-24 10:39 |只看该作者
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回复 18704632883 的帖子0 h) |/ Y7 x+ ~4 k1 C% i
9 {5 ?9 P. T' q8 a, \& B' X6 `
对你细胞的不幸表示sorry

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报纸
发表于 2014-4-24 10:43 |只看该作者
加点抗生素试试~~~
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地板
发表于 2014-4-24 14:00 |只看该作者
小心吸掉旧培养基,用带双抗的PBS洗一遍,吸掉,用双抗洗三遍,最后一遍不吸走,放入培养箱中5min,至时间,吸去双抗,再用带双抗的PBS洗一遍,吸去PBS,加带有2倍双抗的培养基,放入培养箱继续培养,第二天观察。如果第二天污染消除,则用含有一倍双抗的培养基继续培养;第二天仍有污染,用前面的方法在试一次。个人经验仅供参考哈。
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发表于 2014-4-24 15:58 |只看该作者
重新开始把  超级讨厌这种情况
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发表于 2014-4-24 22:16 |只看该作者
细胞污染只能扔掉,连这都要补救,这种细胞培养的态度后面iPS铁定也养不好的
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发表于 2014-4-25 13:28 |只看该作者
回复 hswu01 的帖子
3 S: k& m; }7 f: X2 R. q
! I* g" C& c# J4 E$ z+ Q效果不行吧,细胞已经弥留了,再加上这么折腾,细胞肯定挂啊。
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发表于 2014-4-25 13:29 |只看该作者
扔掉吧,意义不大了补救。你可以平行做实验呀,多几个批次,可以降低风险的。
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