求助：干细胞诱导分化

myylovewp

各位前辈好，我最近做MSC诱导分化实验，向成骨和成软骨细胞方向分化成功，但是向成脂肪细胞分化不成功。这个结果说明什么？我已经验证过了，成脂诱导液没问题。希望大家能提点一下，不胜感激！

levell

应该还是诱导方案的问题，脂肪诱导是很容易的啊

sunnyhuan0629

这三个诱导中，脂肪是最简单的啊，软骨相对较难，你都做出来了，应该还是诱导方案某个细节出了问题吧，或者是你添加的量的问题？这个已经很成熟了，不晓得你用的是什么诱导液配方？尽量选择成熟的方法，肯定是能顺利做出来的。

青云之上

这个估计就是诱导培养基或者是方案有问题~~~

luyue6453

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能否把诱导配方分享一下，大家一起探讨一下。

myylovewp

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诱导方法严格按照GIBCO的说明书，就是选择五代以内的MSC接种到12孔板，等到细胞融合度达到60%时换成诱导液，每隔3天换一次诱导液。到7-14天就应该有结果。但是我都到22天甚至更久还是没有。。。相比之下同期的脐带源MSC成脂诱导就非常好，在第6天时就看到大油滴。

myylovewp

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3 X0 [5 X& p+ `2 `" g
- h# y& p% d* f8 v  q: U$ V我是从CIBCO厂家直接买的诱导液，诱导液没有问题，因为同期的脐带源MSC成脂诱导效果就特别的好。胎盘源的MSC成脂诱导就死活做不出来，已经做了3-4次了，细胞密度，代数。。。都调整过了，就是没有结果。现在急得要命，也不知道哪里出了问题？？？是不是我的细胞有问题？

myylovewp

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/ C2 a" |2 i* {# g2 w如果诱导培养基和方案都没有问题,那还有别的原因吗？因为诱导液我已经验证过了，它能诱导脐带源MSC成脂肪细胞，胎盘源的MSC一直做不出来

luyue6453

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  s6 I  U, S- s+ B5 }1 x9 M4 \
2 w, G+ Y& V/ O# N你要不要看看两种来源的MSC生长状态是不是一样的，调整一下种植密度，胎盘的我还真没做过，一般接种密度70%开始诱导好点，是用甲醛固定吗？

myylovewp

回复 sunnyhuan0629 的帖子( m# r' S) _: J/ m% d

, B8 ]( w" G' o/ r8 `9 h! v1 B0 F我用的是CIBCO的成脂诱导液，应该不是诱导液的问题，因为我用它诱导脐带MSC就成功了，方法一样。如果MSC能诱导成成骨和软骨细胞，那按道理说也会诱导成脂肪细胞的是吧？细胞应该没有问题，只是我的方法不对？