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楼主: yiwuya007
go

大家看过来---小鼠BM-MSC   [复制链接]

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发表于 2014-7-1 15:58 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子
/ l4 [" S# b) i8 B  A, `% @* M5 A
$ i* ^: G7 L! v3 a+ u% B& p# c谢谢.
5 d* o0 K' O: f+ f1。 能否给出cell stem cell那篇文章的具体信息?2 z0 |8 B& k3 o, P  y" T# f' f% ?3 l
2。 血清20%不会导致分化吗?

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发表于 2014-7-2 08:14 |只看该作者
艾玛,我还以为是我发的帖,跟LZ握个手,这个图片太像我培养的原代MSC了。直线那个我也看到过几次,我自己感觉也是因为划伤了培养板。我也有很多张得很大的细胞,那种细胞基本不分裂,好像也不死亡,所以细胞基本就是不长了。感觉跟传的密度低了有关系。楼上说的提高血清浓度没有试过,最近在实验不同公司的血清,好像有一些血清会特别好,第一代出来的细胞形态就很好。4 b9 H: I9 L0 i2 q) x7 n- q' a
另外歪个楼,问问,大家觉得老鼠多大年龄取MSC 好呢? 文献一般都说6-8周,问过stem cell公司,说8周之后一定不能用,6周前一点点也可以。但是都没有说是为什么。 我最近同时测验了2个,一个是6周的老鼠,一个是4周的老鼠,感觉4周的老鼠,出来的MSC更多(才4天),而且形态非常好。但是如果是这样,为什么文献不用4周的呢?
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发表于 2014-7-2 08:47 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子+ I$ H9 V0 k8 @7 u; d1 L! _6 o2 [
/ H. j- P* \+ o8 _1 q4 q# k  L
文献为什么不用这个问题很有难度  不过我们一般用2周左右的(新手上路,效果待定,其实个人感觉有点点小了)~  ) v/ \9 i' \/ y! e8 h+ t! D
另外我也歪个楼,看有前辈提到雌鼠比雄鼠更优,不知大家是否有经验,怎么看?
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发表于 2014-7-2 09:05 |只看该作者
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回复 viv2005 的帖子  y) ]5 K: {5 d* W7 f7 i

, \9 e3 W& r: `4 e4 A能否愿意提供哪种血清效果好?谢谢。
) }4 S) p( K: ?5 Q/ B老鼠年龄的问题,看了多篇文献,多篇讨论,但是用多大的都有,甚至有说成年了,更好。这个,我觉得和老鼠个体有关。我提过两次了,第一次的骨髓腔显然没有第二次的红,其实两次年龄差不多。
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发表于 2014-7-2 09:16 |只看该作者
回复 yiwuya007 的帖子
, A' _* I% }* l, _- ?$ b7 o, }  b/ K- I- F8 U
我试过corning和Gibeco还有一个杂牌公司了,现在感觉是Gibeco的最好,我一直用的10%的血清。能不能给一两个提到用未成年老鼠的paper的标题呢?
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发表于 2014-7-2 09:17 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子2 `/ V5 W9 a5 X; v

" L. X' T7 |) u- @这个性别还真没注意,是不是雌性的造血系统更好,左右干细胞更多。我下次比较下试试。
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发表于 2014-7-2 09:24 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子0 v. F  i. D7 K8 i; B1 Y

6 }% b8 E$ ^6 w& r. Z. m* C1 YA protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone.
& N. k- V. {% Q$ J5 _% D我记得好像是这篇文章
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发表于 2014-7-2 09:39 |只看该作者
yiwuya007 发表于 2014-7-2 09:24
: l/ u8 G, a8 Q& g* A" j( M; {: g回复 viv2005 的帖子, j) P" C( j+ X9 s  t7 u
) K8 c" n# t3 G: @# A
A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compa ...
9 o3 h7 l" L' r- J" B- E! c
这篇我看过,我记得他们是弃了骨髓,只用了compact bone。我猜他们用年龄小的老鼠,是因为骨头密度相对小一些,然后比较好消化。
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发表于 2014-7-2 11:54 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
, E- j: g7 ]: a( c6 Z9 G0 s9 n8 c5 A5 m* k" @
好!期待分享哦 血清同一个牌子也要看产地吧 我们目前用的南美的 据说澳洲的最好
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发表于 2014-8-10 12:07 |只看该作者
1.我在实验室也遇到类似情况,后来探讨认为细胞培养皿的问题,有些厂家的培养皿上面有划痕,会产生这种现向6 I3 e! e& Y8 F4 |% g
2.细胞生长速度有很多因素可以影响:老鼠的年龄,血清的批次,建议摸索一下血清的批次
9 ]- g) w& S" _9 W5 j' Q3.细胞的形态我觉得是老了,这样子的细胞聚集好像已经失去了任何分化能力
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