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楼主: yiwuya007
go

大家看过来---小鼠BM-MSC   [复制链接]

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发表于 2014-7-1 15:58 |只看该作者
回复 sysuhoo 的帖子
2 n! V0 z9 C3 C" c: p
- R  C* q. P# b+ Q, u谢谢. 2 L9 n1 I& P7 x1 a  D
1。 能否给出cell stem cell那篇文章的具体信息?4 ^( S' {9 V/ y( \8 e
2。 血清20%不会导致分化吗?

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发表于 2014-7-2 08:14 |只看该作者
艾玛,我还以为是我发的帖,跟LZ握个手,这个图片太像我培养的原代MSC了。直线那个我也看到过几次,我自己感觉也是因为划伤了培养板。我也有很多张得很大的细胞,那种细胞基本不分裂,好像也不死亡,所以细胞基本就是不长了。感觉跟传的密度低了有关系。楼上说的提高血清浓度没有试过,最近在实验不同公司的血清,好像有一些血清会特别好,第一代出来的细胞形态就很好。4 R7 |) e, i+ q) \' [. ~
另外歪个楼,问问,大家觉得老鼠多大年龄取MSC 好呢? 文献一般都说6-8周,问过stem cell公司,说8周之后一定不能用,6周前一点点也可以。但是都没有说是为什么。 我最近同时测验了2个,一个是6周的老鼠,一个是4周的老鼠,感觉4周的老鼠,出来的MSC更多(才4天),而且形态非常好。但是如果是这样,为什么文献不用4周的呢?
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发表于 2014-7-2 08:47 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
: R" e% m9 o* o4 y: r
$ C: P! o- n: c0 J0 N* b; }: x9 D# J文献为什么不用这个问题很有难度  不过我们一般用2周左右的(新手上路,效果待定,其实个人感觉有点点小了)~  & G% k0 |* g" F8 K' o' K* u" X
另外我也歪个楼,看有前辈提到雌鼠比雄鼠更优,不知大家是否有经验,怎么看?
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发表于 2014-7-2 09:05 |只看该作者
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回复 viv2005 的帖子. Z4 r- ?& L' j) g0 ^" d) r9 @- K

+ a2 G1 g3 e9 ?" S能否愿意提供哪种血清效果好?谢谢。
+ E+ x4 G. q. e7 h老鼠年龄的问题,看了多篇文献,多篇讨论,但是用多大的都有,甚至有说成年了,更好。这个,我觉得和老鼠个体有关。我提过两次了,第一次的骨髓腔显然没有第二次的红,其实两次年龄差不多。
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发表于 2014-7-2 09:16 |只看该作者
回复 yiwuya007 的帖子
& J/ P  i. g+ g9 t6 U
  x! s& o# T1 R6 v我试过corning和Gibeco还有一个杂牌公司了,现在感觉是Gibeco的最好,我一直用的10%的血清。能不能给一两个提到用未成年老鼠的paper的标题呢?
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发表于 2014-7-2 09:17 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子/ f* k5 V- ~6 Q$ J

5 H& k1 j7 G2 Y) P8 B: B这个性别还真没注意,是不是雌性的造血系统更好,左右干细胞更多。我下次比较下试试。
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发表于 2014-7-2 09:24 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
3 n- x' L; W5 W% M9 U' K& M8 t
! J- s( {' x' I8 |8 _0 c- gA protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone.2 p4 J. v5 q+ F
我记得好像是这篇文章
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发表于 2014-7-2 09:39 |只看该作者
yiwuya007 发表于 2014-7-2 09:24 1 Y, z/ y% [1 `  U6 l  m8 L3 A
回复 viv2005 的帖子0 g$ a6 ^" O" p

% S3 j; L0 P( P" b0 O9 z) VA protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compa ...

7 d" o2 C* E, I+ M8 n- D  y0 H这篇我看过,我记得他们是弃了骨髓,只用了compact bone。我猜他们用年龄小的老鼠,是因为骨头密度相对小一些,然后比较好消化。
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发表于 2014-7-2 11:54 |只看该作者
回复 viv2005 的帖子
- `' ~! \, }" [1 L
: V- [- G" ?5 ], D9 |! c好!期待分享哦 血清同一个牌子也要看产地吧 我们目前用的南美的 据说澳洲的最好
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发表于 2014-8-10 12:07 |只看该作者
1.我在实验室也遇到类似情况,后来探讨认为细胞培养皿的问题,有些厂家的培养皿上面有划痕,会产生这种现向+ ^' L2 k- T) s- e
2.细胞生长速度有很多因素可以影响:老鼠的年龄,血清的批次,建议摸索一下血清的批次1 L1 e' F" s5 u4 ^- |
3.细胞的形态我觉得是老了,这样子的细胞聚集好像已经失去了任何分化能力
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