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楼主: yangpan521
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求指导NK细胞培养   [复制链接]

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11楼
发表于 2014-8-6 11:40 |只看该作者
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用CD3单抗和IL-2刺激起来的,而且CD3-CD56+只占到20%!这怎么能叫NK细胞呢?
0 U$ K4 d$ q7 V- ?+ `/ u6 S: j) ?9 e' D* D' q, S/ S
这不是CIK吗?
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12楼
发表于 2014-8-6 12:16 |只看该作者
一般2D补液。计数都翻倍。14D后一般扩增300倍。脐血流式40%以上。外周血30%
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13楼
发表于 2014-8-6 13:51 |只看该作者
回复 jianglei_sd 的帖子
% ]+ x) |3 g# T1 q9 P! |0 B
) Y' O5 E. b! R( }: l3 m还在摸索阶段,请指导

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14楼
发表于 2014-8-6 13:52 |只看该作者
回复 gondobar 的帖子
4 t8 @! r4 j1 l6 T7 h9 H% N  H' f3 ~1 p4 P) V9 J. j
请问你是怎么分离的,我还在摸索阶段 ,有很多问题,请指导,谢谢

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15楼
发表于 2014-8-6 20:46 |只看该作者
以前我比较50ml离心管和15ml离心管分单个核细胞的量,结果15ml的离心管分的更多一些,建议可以用15ml的离心管分离试一下。
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16楼
发表于 2014-8-12 14:15 |只看该作者
我们分离单个核细胞的时候不稀释,因为稀释的时候会将血浆也稀释了。添加的血浆不要超过10%,不然细胞会不爱长。另外你们是有什么特殊原因要定在10天么?我们这是14天
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17楼
发表于 2014-8-12 14:53 |只看该作者
用饲养细胞那种好像活性会好一些,不过真的是不太可行,本身就属于癌细胞,伦理上过不去吧。怎么跟患者解释这些问题都有,所以我们没采取这种方法。
1 v# S$ U% U, J; c0 v. C2 q. [我们家是用的日本一家公司的技术,他们提供培养基,然后教给你操作流程。效果还是不错,就是比较贵。所以我也没办法把具体流程透漏给你,希望你见谅啊
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18楼
发表于 2014-8-18 09:06 |只看该作者
回复 单个核细胞 的帖子
% b% D2 C' H5 r  h2 D$ U; s
. {" Z. R' o- ?! R- h7 E" DNK的培养瓶,提前孵育效果会更好。
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19楼
发表于 2014-8-19 17:09 |只看该作者
回复 wind789 的帖子5 o, W2 Q) B8 @' S; n& ^. S
/ [, k$ U& W0 F( X1 W) G
那NK细胞怎么样才算是培养成功呢?

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20楼
发表于 2014-8-19 17:10 |只看该作者
回复 gondobar 的帖子9 m; X) ]4 w: ^0 \

5 l& X- Z: k+ y# u# f6 o0 @想问一下NK细胞回输标准是什么
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