质粒转染效率

yeshch

含目的基因的质粒经过酶切测序鉴定都没问题，但是转染效率总是很低（看GFP荧光），收的病毒暂时不敢用；而且同样的操作，其它的基因转染效率却很高，请问可能是什么原因？

qingxingruyu

相同的表达载体吗，也遇到过这样的问题，但没想过为什么，同样期待有人能给出解释

zb_ming

片段大小也影响转染效率。

luyue6453

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8 Z% x5 N' I( ^: d
+ A- _  a; c- K( q转不同的基因肯定出现不同的表达量，有的比较易表达，有的根本还不表达，主要看载体的启动子等调控原件，不行就换转染方法

刘彩云

你用的什么转染方法？脂质体转染效率本来就很低，转不上多少也正常，你可以试试电转。

yeshch

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' k3 {' e7 h# T& ]+ L* B  K+ t) b; ]; {' m, c* B, x
我用的钙转；脂质体转染很贵但效率很高啊；电转更贵！

yeshch

回复 luyue6453 的帖子) g2 a9 T( @9 m0 s& v0 I1 I6 N/ k

* {8 X% c  _+ W9 W: X* t嗯哦，谢咯！

creatine

* d6 b# u4 q$ @! p
  x( w' g" J  i) d2 L8 l. g不知道你做完，有没感染下然后qpcr检测下看下？如果只是荧光的话不一定靠谱。另外以前是不是在保研论坛见过？看你头像一样。

yeshch

$ ~! t2 s5 r* F
, b) f  _, ^4 `
回复 creatine 的帖子3 U, Q1 _4 V; P* [: g9 u$ S

& \2 i& x1 x) U6 d: M% h9 d好像是的，以后继续向你学习

xiaostou

有条件的话试试核转的方法，Lonza出的电转仪，直接转到细胞核内。