请教诱导ips的一些过程

vikimei

用MEF细胞诱导产生ips实验的一写问题，求指教
* y$ d5 R) k3 G4 \  w  H4 U/ w1.用六孔板培养细胞，细胞密度应该多少合适？   , k3 ]" E. N2 p; o! Q% F
2.是不是从开始诱导就把MEF细胞铺到饲养层上？饲养层密度多少合适，跟养ES细胞密度一样吗？$ M* U, y! i0 a6 Q- y3 F6 L
3.诱导过程中细胞长满用不用传代，传代的话按几比几？