western blot用牛奶奶粉封闭时，必须用牛来源的二抗么？

me望梦成圆

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! _9 A2 p' w. m$ B( o7 \  ]- b: l  用牛奶奶粉封闭时，必须用牛来源的二抗么？用其他二抗是不是会与封闭液中的蛋白结合呀？

qingxingruyu

你是为了赚威望啊，二抗当然是抗你的一抗，不关脱脂奶的事儿

heirrii

不用

晴斗斗

二抗是跟一抗结合，需要注意一抗的来源，二抗要是跟牛奶结合的话，那不是整张膜都是信号

senmiao

脱脂牛奶只是起封闭的作用，其他的封闭液还有FBS、鸡卵白等等，只不过牛奶便宜，还可以用过期的呢

rileila

这完全没有关系的，只是起封闭作用，负责抗体结合到板子上而已啊，不是吗？

hansonyao

没关系啊

蔚海橙天

最好查一下你的一抗的说明书，看看是哪种来源的，然后根据一抗选择二抗，脱脂牛奶只是封闭作用不是选择二抗的依据。

Jiangshi90

可能会结合，但结合得不牢，洗洗就掉下去了，没有二抗先与特异性的抗体结合强

luoan

先搞清楚封闭液的作用，就不会提出这样的问题了：膜与蛋白的结合是疏水相互作用，刚转膜完时目的蛋白与膜相互结合，但膜上还有很多区域未结合蛋白，因此如果不封闭，一抗也是蛋白也会与膜疏水结合，高背景。封闭液是BSA或脱脂奶粉配成的，其蛋白成分会与未结合蛋白的膜结合，及封闭未膜上未结合蛋白的区域，这样就防止了一抗的非特异性结合。封闭液跟二抗根本没啥关系。