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楼主: sdzhxq
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CIK细胞培养一周死亡   [复制链接]

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发表于 2014-11-6 09:39 |只看该作者
培养基加多了。你试一下加10~20ml培养基...
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发表于 2014-11-6 09:40 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子# W+ e# G# b8 k
$ B. O- w. Y' g% ]4 R" N5 u
CD3的濃度有點髙,50就可以,
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发表于 2014-11-6 09:42 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
# G; g0 \0 i- \# M1 Q7 u  A) r9 L6 @" D6 T4 S
1.5---2之間 ,試試看看

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发表于 2014-11-6 10:12 |只看该作者
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一开始有聚团是正常现象,LONZA的培养基直接用就可以。有图片上张图片看看,关于接种浓度1.1x 106/ml 是可以的0 e3 J! M1 \5 `$ Y+ z2 q
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发表于 2014-11-6 10:44 |只看该作者
回复 fenlichong 的帖子3 M9 m# B. k" ?% r- s/ `

3 Q4 w! y9 N" [# q  x6 W2 tPBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%?我们实验室培养方法基本都是一致的,有的培养出口细胞增殖倍数也不高,最高40多倍,不像文献上说的增殖几百倍的。
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发表于 2014-11-6 10:45 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子
9 X/ R& J* A5 ~. `
# W, r! E0 C( h. U( d谢谢,按照提供的方法试试

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发表于 2014-11-6 10:47 |只看该作者
回复 holy0606 的帖子+ E' q* |- A/ \3 F0 I- H
3 Z9 q, Z" f  E: l( ]. D
我们用的CD3不是进口的,可以吗?下一步可以试试50浓度的

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发表于 2014-11-6 21:18 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
  @! F! Y! E- H& Y$ R7 _+ P1 S5 r: e1 ]
PBMC的细胞纯度我也不知如何确定,个人认为应该有如下几个指标:1.离心后获得的白雾状细胞层较纯,少红细胞参杂;2.多次洗涤离心,以去除混杂的血小板等;3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。
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发表于 2014-11-7 12:08 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子8 a& m( ~% b" z+ Y1 h
4 y( a: X# A  M9 A
文献上有些数据都是胡编乱造的,不能只看国内文献,多看看外文文献
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