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楼主: sdzhxq
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CIK细胞培养一周死亡   [复制链接]

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优秀会员 帅哥研究员 积极份子

21楼
发表于 2014-11-6 09:39 |只看该作者
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培养基加多了。你试一下加10~20ml培养基...
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22楼
发表于 2014-11-6 09:40 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
) V5 A0 M7 o7 N* y  T7 D5 E% |$ `) @3 o$ G# T( y) g
CD3的濃度有點髙,50就可以,
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23楼
发表于 2014-11-6 09:42 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子4 V& M( K# s% ?0 G' g$ |$ d

- R& m* S% I# b) j1.5---2之間 ,試試看看

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24楼
发表于 2014-11-6 10:12 |只看该作者
一开始有聚团是正常现象,LONZA的培养基直接用就可以。有图片上张图片看看,关于接种浓度1.1x 106/ml 是可以的
  D! ?( @0 Y7 V6 o- o9 e8 B. R
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25楼
发表于 2014-11-6 10:44 |只看该作者
回复 fenlichong 的帖子
0 i5 n$ N5 u1 M( i1 T3 x5 X* T1 N) O& }' |
PBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%?我们实验室培养方法基本都是一致的,有的培养出口细胞增殖倍数也不高,最高40多倍,不像文献上说的增殖几百倍的。
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26楼
发表于 2014-11-6 10:45 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子4 ^! o/ p# \7 E, z) L' d

% h+ T: ?3 e$ ?5 s. W谢谢,按照提供的方法试试

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27楼
发表于 2014-11-6 10:47 |只看该作者
回复 holy0606 的帖子
  |1 b4 K. O+ O# Y' v$ }% s
$ J+ Q2 c# U9 ], X9 }6 e我们用的CD3不是进口的,可以吗?下一步可以试试50浓度的

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28楼
发表于 2014-11-6 21:18 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子% _' t5 e4 [4 C( ~; q) N

* T* y! {1 b3 C' ~2 q. @! HPBMC的细胞纯度我也不知如何确定,个人认为应该有如下几个指标:1.离心后获得的白雾状细胞层较纯,少红细胞参杂;2.多次洗涤离心,以去除混杂的血小板等;3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。
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29楼
发表于 2014-11-7 12:08 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子* j. T/ u* R4 s2 H- F1 T
8 A* m# ]4 {7 X, w, h. q
文献上有些数据都是胡编乱造的,不能只看国内文献,多看看外文文献
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