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AdvCell® 间充质干细胞无血清培养基   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-11-17 12:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 佰通生物 于 2014-12-3 15:47 编辑

       佰通生物(BioWisetech)AdvCell®  间充质干细胞无血清培养基根据干细胞的生长需要,培养基包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质、血清替代物以及其他补给成分。非常适用于培养哺乳类干细胞,包括脐带干细胞,骨髓干细胞,脂肪干细胞等 间充质干细胞。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定,使用该培养基能使干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化(至少10代以内)。

★   产品号
      Cat NO:BSFMOO01

★   产品适用范围
      适用于人及哺乳类来源的间充质干细胞或成体干细胞的培养,包括脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞及脂肪干细胞。

★   使用注意事项
1.完全培养基的制备:将以上AdvCell®  间充质干细胞无血清培养基(BSFMOO01)中的AdvCell®  间充质干细胞基础培养基 (BM0001)、AdvCell® 干细胞培养添加剂 A(SCM0001A)以及AdvCell® 干细胞培养添加物B(SCM0001B)于37℃解冻并迅速混合。
2.完全培养基的存储:配制好的完全培养基放在4℃冰箱避光保存,并尽量在一个月内使用完。
3.根据需要,培养过程中可添加一定剂量青霉素∕链霉素(P∕S)。
4.为达到最佳培养效果,所有细胞培养皿或培养瓶在接种细胞前用细胞垫材料(Cellpad)﹙BCP0001﹚包被过夜或室温包被2小时,包被后用吸管取走多余的 AdvCell® 细胞垫材料﹙BCP0001﹚,再接种胞。
5.如客户用自己配制的冻存液冻存的细胞是用作临床治疗,应避免用甘油作为保护剂。

★   培养条件
       37℃,5%CO2 ,无菌恒温培养箱培养。

★   细胞培养

【复苏】
1.将配置好的完全培养基放入37℃水浴中预热5-15 min;
2.从液氮中取出干细胞迅速放入37℃水浴快速解冻(解冻后不要继续孵育细胞);
3.在超净台中加入5 ml的 完全培养基重悬细胞,1000 rpm离心5 min;
4.弃上清,加入 5 ml的完全培养基重悬细胞,转移到T-25培养瓶中(带滤芯);
5.将培养瓶置于37℃,5%CO2 的无菌恒温培养箱中培养;
6.第二天用新鲜的 完全培养基给细胞换液。

【 培养】
1.在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到80%时,即可传代;
2.37℃水浴预热完全培养基;
3.在超净台中,弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基,加入2 ml PBS清洗,再加入1 ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞;
4.在显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,即可加入5 ml 完全培养基终止消化;
5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞转移到15 ml离心管中,1000 rpm离心5 min;
7.弃上清,加入15-20 ml的 完全培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例传到T-25细胞培养瓶中。确保后融合度在25-50%之间,细胞密度在1×104cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混合细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将细胞培养瓶置于37℃,5%CO2 的无菌恒温培养箱中培养;
9.每两天用新鲜、预热的完全培养基进行换液。

【冻存】
1.细胞消化和计数,用胰酶对待冻存的细胞进行消化,并对细胞进行计数。
2.1000 rpm离心5 min,去掉上清。
3.根据细胞计数的情况,加入适量的冻存液,使细胞密度在1×106/ml左右(或根据自己希望达到的细胞密度)。
4.轻轻地重悬细胞(务必重悬均匀),将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管(需提前做好标记或者贴上标签)中,旋紧冻存管盖。
5.将冻存管放入程序降温冻存盒中,然后将冻存盒直接放入-80℃。
6.第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。

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沙发
发表于 2014-12-1 09:39 |只看该作者
最近总是有实验室老板和学生向我咨询到底该买哪一款无血清培养基,什么牌子的无血清培养基比较好,不知道作何选择。确实是,目前市面上有多款无血清培养基,琳琅满目,有好也有坏,要想使用一款比较好的无血清培养基,对于刚刚使用无血清培养基的老师和同学而言还是比较不容易甄别的。本人十几年来天天跟干细胞培养打交道,使用过市面上绝大部分无血清干细胞培养基尤其是脂肪干细胞和间充质干细胞的无血清培养基。每次最开心的就是每当市面上出现一款新的无血清培养基的时候就买回来赶紧试一试效果,呵呵,这也算是一个小小的爱好。

1. MesenCultTM 间充质干细胞无血清培养基
  非常好用的一款无血清培养基,著名的Stemcell Technology公司的拳头产品。我个人还是比较有感觉的一款培养基,以前经常用来饲养人的骨髓间充质干细胞,扩增迅速,形态也非常好,脂肪干细胞也用它培养过,效果也还是可以。脐带来源的间充质干细胞也饲养过,个人感觉一般,主要是扩增不太好,后来就没有再用了。顺便说一下,买了他家的产品就送一张精美的干细胞相关的大海报和精美宣传册,确实是一家比较用心的公司。

2. Advcell○R间充质干细胞无血清培养基
   佰通生物 (BioWiseTech) 的子牌子,这个牌子在国内主要是给工业客户提供无血清培养基,在实验室可能不如Stemcell Technology和Gibco牌子响亮和普及,但是却是我非常认可的一个牌子,非常有潜力,培养效果超好(呵呵,别喷我,我不是商家,也不是推手,我不给这些公司打广告,好用就好用,不好用就不好用)。我最初用这个牌子的无血清培养基是因为我采用人的眼袋组织分离脂肪干细胞的时候,使用了其他无血清培养基都没有分离出来,最后无奈在市面上买了一款他家的针对脂肪干细胞的无血清培养基马上用上,结果有很多细胞贴壁,FACS显示 CD29,CD44表达高达98%,CD90和CD105表达也在95%左右。我一下就来了兴趣,把他们家的间充质干细胞培养基也拿来培养我们的细胞,令我感到惊讶的是,骨髓来源的间充质干细胞和脐带来源的MSC都能够很好地扩增,速度非常快,干性维持也非常好,有一次我扩增了十七八代,表型分析和三系分化实验完全没问题,核型分析也完全正常。现在我基本上大多数时候养脂肪干细胞和间充质干细胞都用这个牌子。关键是性价比超高啊,像我这种做治疗研究的人,用的量太大,全买Stemcell Technology伤不起啊。

3. StemPro○R MSC SFM无血清培养基
大名鼎鼎的Life Technology公司的产品,号称第一种适合培养人的间充质干细胞的无血清培养基,饲养骨髓间充质干细胞效果还是非常不错的。但是我们用来培养脐带来源的间充质干细胞扩增不如Advcell○R和MesenCultTM效果明显。饲养脂肪干细胞的话,不推荐使用,我们用过来饲养抽脂分离的脂肪干细胞,细胞比较容易分化。

4. Sciencell的间充质干细胞无血清培养基
美国的牌子,国内较早就有代理商卖他们的间充质干细胞无血清培养基。以前我们主要用这个牌子来养脐带来源的间充质干细胞,细胞形态也非常好,扩增迅速。骨髓来源的间充质干细胞和脂肪干细胞也用过,效果还行。他们的培养基相比于其他国外的品牌性价比还是非常高的。

5. Oricell无血清培养基
     广州赛业生物的培养基,这个牌子推广力度比较大。我们以前用他们的间充质干细胞无血清培养基来饲养小鼠的骨髓间充质干细胞,效果还是比较好的,扩增速度较快。用它培养小鼠的骨髓间充质干细胞传个五六代还是没有什么问题的,再往后的话,感觉分化还是稍微有些严重,不过现在不知道培养基优化得更好没有。

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藤椅
发表于 2014-12-18 10:16 |只看该作者
很感兴趣,可以提供价格明细吗???

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包包
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板凳
发表于 2014-12-19 10:31 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 cartoonyang 的帖子

您可以联系15000618025 刘经理。方便的话您给我留个联系方式以及邮箱或者是QQ,我把所有的价格明细发给您。

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报纸
发表于 2014-12-19 14:34 |只看该作者
回复 佰通生物 的帖子

可以,麻烦发资料到我的邮箱,85997362@qq.com。谢谢!

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包包
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地板
发表于 2015-1-20 13:36 |只看该作者
       佰通生物科技(BioWiseTech)是一家专业从事生命科学及再生医学的高科技平台,拥有世界一流的实验室,包括多种先进的实验设备以及一批经验丰富的技术专家,主营生物前沿相关产品及技术推广,包括基因操作、细胞培养、纳米技术、分子诊断以及再生医学等领域。佰通生物不仅为国内外众多药厂和科研机构提供研发服务, 还为科研及再生医学机构提供干细胞培养基以及重组细胞生长因子。在美国麻州、中国上海、苏州、深圳等发达城市均有分支机构。佰通商城主营生命科学及再生医学相关的核心产品,其独特的AdvCell系列培养基适用于哺乳生物来源的干细胞、免疫细胞等原代细胞的快速增殖,可广泛用于各种个性化细胞文库的建立及个性化细胞美容、养生及再生医学的应用。目前佰通生物主营业务是为实验室及相关研发机构输出干细胞培养技术及免疫细胞培养技术。
    佰通生物生产的干细胞培养基和免疫细胞培养基已经进入多项资质试验与认证前阶段,产品质量控制指标达到GMP样品要求,佰通生物建立起完善质量保证体系,所有产品均有卓越的质量保证。佰通生物还在积极开拓仙蒂诗(CellMatrix)网络抗衰老系列产品包括细胞基质赋活紧致面膜(Rejuvenating & Firming Mask)、白金赋活面膜(Whitening & Rejuvenating Mask)、细胞基质赋活紧致精华液(Resilience & Revitalizing Essence)、抗衰老口服液(Anti-aging Drink)、男性饮品(Man's Drink)、活力精粹(Vigor Essence)的研发与规模化生产,预计几年内年产值能达到亿元以上。佰通生物已经拥有自主知识产权的产品18项,发明专利技术12项,并与国内外知名大学、中科院以及医科院等知名科研机构建立了良好的合作关系,在生物尖端技术方面能够持续创新。
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