诱导过程中挑选克隆的标准 与 iPSCs 的传代（有饲养层与无饲养层）

jojo1988509

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" v5 I: {% e$ C# Z  r- A  c
Life直接就有卖的活染的TRA1-60、TRA1-81、SSEA4，直接有详细步骤的。

mecol

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1 ~; T0 `4 F: W$ `; M! [. Q# p) I* H, }1 B
请教一下，AP染色后的细胞还可以接着培养并传代吗？

Andyhigh

回复 mecol 的帖子3 o6 m$ n% W- L: o9 ^
, Q( N& D& E6 i& R/ F5 p" ~( }
细胞经 固定 透膜后都死了，所以是不照的！

Andyhigh

回复 jojo1988509 的帖子7 q4 @1 a4 I4 Q* y+ k; \) Y

$ y- O3 S& E& d' x/ x0 A可有相应的货号哈？

mecol

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9 M1 `. M6 P6 v/ H5 f+ m6 u# M9 y7 \8 I6 E
好的，谢谢

陈阳阳

1：手动挑取形态比较好的克隆，条件：呈明显突起，致密，消化后传到无feeder的96孔板，用ES+2I培基，然后接着传代至48，24，12，6孔板，最后挑状态好的进行冻存和下一步的实验。/ Y. L. J0 x9 r
2：iPSCs 传代的问题，不知道大家用的是什么样的方法，是单细胞传代还是克隆传代？   , a9 \  S- }( q# w6 j
     直接用胰酶消化传代即可。. T: N9 i0 A6 e4 O9 I0 X
3：自己在试验当中，发现克隆的同步性不是很好，大家是如何确定最佳时间的？
$ W7 m" M  h  ]     克隆的同步性本身就不是一致的，所以不用担心这个。只要有出现形态好的克隆，就可以挑。挑几十株，最后肯定就可以建系的。也可以出现前面的克隆已经建系了，还有的克隆才传到12孔板还没长起来。& j9 `1 ?' `. V" K" J: x, B$ W
甚至个别孔出现污染（细胞漂浮）；  这应该也是正常情况，你没挑，克隆肯定会分化啊。细胞漂浮，可能是正常的细胞死亡。

jojo1988509

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" e& i# I5 C. u4 {/ u  x: ^$ i: _! U0 O8 \* K  M6 {9 k! C
不好意思，这久太忙了，LIFE的，41-1000，41-1100，41-4000分别是TRA1-60，TRA1-81和SSEA4的