诱导过程中挑选克隆的标准 与 iPSCs 的传代（有饲养层与无饲养层）

jojo1988509

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+ A, ?1 {# q  n
$ E' u* U$ I3 z4 @- k  @' TLife直接就有卖的活染的TRA1-60、TRA1-81、SSEA4，直接有详细步骤的。

mecol

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. a1 F) b; O) D; N/ t3 m- |+ H0 v3 ]7 w3 d, i
请教一下，AP染色后的细胞还可以接着培养并传代吗？

Andyhigh

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0 }0 Y# J2 G: Q& D0 t3 j细胞经 固定 透膜后都死了，所以是不照的！

Andyhigh

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6 h4 _( J) _* H  p0 \! a/ i( Z, [3 |! o+ M) M. F* o* a3 A$ E
可有相应的货号哈？

mecol

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3 g7 i* q0 M) q& p8 W' g) U% u% S4 A& `; D7 V
好的，谢谢

陈阳阳

1：手动挑取形态比较好的克隆，条件：呈明显突起，致密，消化后传到无feeder的96孔板，用ES+2I培基，然后接着传代至48，24，12，6孔板，最后挑状态好的进行冻存和下一步的实验。$ D8 {# c5 g+ u( O0 H" _7 \
2：iPSCs 传代的问题，不知道大家用的是什么样的方法，是单细胞传代还是克隆传代？   
: Z& A9 N6 ?5 a* _6 u     直接用胰酶消化传代即可。& X; J/ ?  T. c( Q
3：自己在试验当中，发现克隆的同步性不是很好，大家是如何确定最佳时间的？
  b% e2 ?5 j; X     克隆的同步性本身就不是一致的，所以不用担心这个。只要有出现形态好的克隆，就可以挑。挑几十株，最后肯定就可以建系的。也可以出现前面的克隆已经建系了，还有的克隆才传到12孔板还没长起来。6 f7 g- X3 \+ B* t" }
甚至个别孔出现污染（细胞漂浮）；  这应该也是正常情况，你没挑，克隆肯定会分化啊。细胞漂浮，可能是正常的细胞死亡。

jojo1988509

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& O9 f. V& x. C. {1 j' `
不好意思，这久太忙了，LIFE的，41-1000，41-1100，41-4000分别是TRA1-60，TRA1-81和SSEA4的