诱导过程中挑选克隆的标准 与 iPSCs 的传代（有饲养层与无饲养层）

jojo1988509

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8 e8 x6 J$ R' {6 G
) u, J" x( C$ o# b  o7 N5 n6 o/ aLife直接就有卖的活染的TRA1-60、TRA1-81、SSEA4，直接有详细步骤的。

mecol

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7 U1 [6 w; U9 P' Z4 U8 o$ j) i6 X+ J  h8 A0 a) p& e" a
请教一下，AP染色后的细胞还可以接着培养并传代吗？

Andyhigh

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8 E$ ~  }+ G1 \8 U5 h
. J$ Y" {! ?  d1 e6 L% [" \细胞经 固定 透膜后都死了，所以是不照的！

Andyhigh

回复 jojo1988509 的帖子5 b* g4 e. v' X; }

3 O' y& ]. p5 I0 H( L9 o可有相应的货号哈？

mecol

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' |$ W$ t4 u. ^5 Y1 S4 h0 o3 h$ ^" t; p/ u( L: K- N' V
好的，谢谢

陈阳阳

1：手动挑取形态比较好的克隆，条件：呈明显突起，致密，消化后传到无feeder的96孔板，用ES+2I培基，然后接着传代至48，24，12，6孔板，最后挑状态好的进行冻存和下一步的实验。
" w+ g$ p$ }) p; i2：iPSCs 传代的问题，不知道大家用的是什么样的方法，是单细胞传代还是克隆传代？   
% o' _+ V2 @  V, y* f     直接用胰酶消化传代即可。& S: l7 t3 W4 W0 x; N
3：自己在试验当中，发现克隆的同步性不是很好，大家是如何确定最佳时间的？
4 l6 [# y, q$ l4 ~& o: T' X# E( [     克隆的同步性本身就不是一致的，所以不用担心这个。只要有出现形态好的克隆，就可以挑。挑几十株，最后肯定就可以建系的。也可以出现前面的克隆已经建系了，还有的克隆才传到12孔板还没长起来。* e% E9 J+ c& R1 S
甚至个别孔出现污染（细胞漂浮）；  这应该也是正常情况，你没挑，克隆肯定会分化啊。细胞漂浮，可能是正常的细胞死亡。

jojo1988509

回复 Andyhigh 的帖子$ k8 z4 ~" y2 u- Q" G. L
3 m" M" U# D# g* k% B8 K4 r5 R
不好意思，这久太忙了，LIFE的，41-1000，41-1100，41-4000分别是TRA1-60，TRA1-81和SSEA4的