手采集外周血培养CIK疑问！！！

lyj-0017

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- m, n+ H) W3 G5 b2 @
/ f. V! k( D( h. ~6 d! a* U1 N采集的外周血离心后，分离出血浆，剩下的不就只有细胞团了吗？再怎么按照1:1加PBS稀释？

lyj-0017

回复 a276038921 的帖子2 I" v, A; e6 Y8 d" @

1 ^  u: `& @( E4 Z混合的时候，有没有可能加入的DC细胞太多，部分DC细胞因接收不到生长信号而凋亡？

lyj-0017

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/ T) K, S6 G9 |  K
7 C. J4 ^& S4 D5 a) i4 Y0 J8 M" A首次铺瓶贴壁时，加入培养瓶中PBMC的密度一般控制在什么范围之内？分离出来的悬浮细胞再次装瓶的密度范围是多少？

aochongyu

以前比较过先离心外周血再加盐水稀释和直接加盐水稀释，感觉先分离血浆得到的单个核更多一些，并且省分离液

lyj-0017

回复 aochongyu 的帖子0 r( I! k) ^0 s0 |# `5 E  K1 J2 u
# e) o& C! m. u! q  R2 N
我个人也感觉先离心外周血再加盐水稀释会更好一些，无奈领导执意认为后者好~

levell

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1 k, B$ V, U+ k" c
& @4 L$ J0 t* N! L, Q, y剩下的细胞也是有体积的啊，按体积加入PBS就好啦

levell

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( ?  u% m: ^8 t" i1 i: R0 e5 J9 u
/ x7 T  X& B% u' S6 V, Z首次贴壁时候将单核细胞调整为2×106/ml，2h贴壁后移出悬浮细胞，调整浓度为1-2×106/ml，以经验来说就直接移出密度就合适着呢，不用再处理，直接加因子就好

xyz2120091064

个人认为先离心富集红细胞再稀释，这样不仅红细胞多而且有自体血浆

lyj-0017

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6 x5 l" i' @" g4 i
OK，非常感谢！

lyj-0017

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+ H6 i% q2 g5 }- Q# ]1 T6 X& l/ G( k% B# F  f# o, l
自体血浆不是已经离心去除掉了吗？