手采集外周血培养CIK疑问！！！

lyj-0017

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( a+ D& \6 u) [8 |0 B
采集的外周血离心后，分离出血浆，剩下的不就只有细胞团了吗？再怎么按照1:1加PBS稀释？

lyj-0017

回复 a276038921 的帖子( a$ S3 o; r( u5 Y9 p

1 {4 U. u2 |$ j. r/ j混合的时候，有没有可能加入的DC细胞太多，部分DC细胞因接收不到生长信号而凋亡？

lyj-0017

回复 levell 的帖子" b- ?6 h( u) R8 `: a9 W
9 [  m, h6 @( I* ~0 Q& m
首次铺瓶贴壁时，加入培养瓶中PBMC的密度一般控制在什么范围之内？分离出来的悬浮细胞再次装瓶的密度范围是多少？

aochongyu

以前比较过先离心外周血再加盐水稀释和直接加盐水稀释，感觉先分离血浆得到的单个核更多一些，并且省分离液

lyj-0017

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' T/ Z1 W9 M+ N/ c: I% Z4 q0 u
) v8 R7 X" D. G2 N& B2 \! C我个人也感觉先离心外周血再加盐水稀释会更好一些，无奈领导执意认为后者好~

levell

回复 lyj-0017 的帖子4 y" v7 O' l  ]% u! @% i+ E

: B- s* F( O" |6 [剩下的细胞也是有体积的啊，按体积加入PBS就好啦

levell

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; I/ ], s. i- I8 X
; |7 d. P9 s+ P% w5 g0 d首次贴壁时候将单核细胞调整为2×106/ml，2h贴壁后移出悬浮细胞，调整浓度为1-2×106/ml，以经验来说就直接移出密度就合适着呢，不用再处理，直接加因子就好

xyz2120091064

个人认为先离心富集红细胞再稀释，这样不仅红细胞多而且有自体血浆

lyj-0017

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2 V/ ]7 H% w' N+ t( e4 K5 v7 h; o9 p" }" M
OK，非常感谢！

lyj-0017

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" `; G3 N; P6 H1 _( U. _8 o4 Q3 ^自体血浆不是已经离心去除掉了吗？