检测细胞增殖的方法

jianglei_sd

有人做过检测细胞增殖的实验吗？, _( Q7 n- z% j4 t! R4 k1 W- Y
麻烦介绍下方法！

未来之星

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: m, |' J) R1 R- A2 uBrdu，好像是检测细胞增殖的一种方法

jxydiandian

      目前细胞增殖检测主要分为五类：DNA合成检测、代谢活性检测、细胞数量检测、细胞增殖相关抗原检测和ATP 浓度检测。在这些方法中作何选择，主要取决于所研究的细胞类型和研究方案。1. DNA合成检测  这是目前实验室中检测细胞增殖最准确可靠的方式。该法是将放射性标记的3H-胸腺嘧啶与细胞一同孵育，这样新增殖细胞的DNA中就会掺入放射性标记，经洗脱后可用闪烁计数器检测。BrdU标记很适合免疫组化IHC、免疫细胞化学IC、细胞内ELISA、流式细胞分析和高通量筛选。2. 代谢活性检测  检测细胞群体的代谢活性也可以反映细胞增殖的情况。常见的方法有MTT、XTT、MTS和WST1。主要是通过标准分光光度计、荧光分光光度计和酶标仪等来进行最终检测分析的。但是精密度的话不如第一种方法喽。3. 活细胞数量  最直接的增殖指标是活细胞数量的变化。但细胞直接计数法操作繁琐费时，所需细胞量较多，而且是比较原始的笨方法，现在一般情况下应该是没有人使用了吧，呵呵。 4. 增殖标志检测  有些抗原只存在于增殖细胞中，而非增殖细胞缺乏这些抗原，因此可以通过特异性的单抗来对细胞增殖进行检测。5. ATP检测  细胞内的ATP含量受到了严格调控，检测ATP也可以得到细胞增殖的信息。( c" w9 d! f3 V$ b1 R9 U
         不过具体选择哪种检测方法，主要依赖于使用的细胞类型和具体研究方案，还取决于实验者在细胞增殖中期望得到的信息。假如希望了解细胞增殖中的代谢活性变化，可以使用四唑盐和比色法检测；如果关注重点在于对DNA合成的改变，可以选择用BrdU或EdU标记，再通过比色法、化学发光或荧光检测进行分析；若研究的是单个细胞，也可以用BrdU或EdU标记来检测DNA合成，将其与荧光标记的相应抗体结合，就可以通过流式细胞仪来进行流式分选。  应该注意，测定细胞增殖很多时候单一方法都是有缺陷的，四唑盐—MTT法不够精确；最直接的指标是活细胞数量的变化，结果比较准确，但细胞直接计数法所需细胞量较多，操作繁琐费时；而3H掺入法麻烦且不安全。所以，建议最好用两种以上的方法进行测定，这样做主要是可以有一个用于辅助修正的数据。
3 }0 Z  w. n, N     以上是个人意见还有借鉴别人的一些经验，希望对你有帮助，祝实验顺利。

suning5

MTT检测，现在有一种CCK-8检测。比较准确，发文章可以用。

yuanyecat

2 W  u4 ^5 R* u, B
. b0 w7 W* Z5 V. Y- a  z" l如果你是检测相对数量的话，我推荐用MTT，这个方法便宜又好用。以下网址有详细的介绍和protocol' l! r  {* r% T2 Y' A, O/ b2 s. g
http://baike.baidu.com/link?url= ... 4M5YaVy1ym007B5JiG_
3 [( X& |: H, o3 ?- k还有一种，是CCK-8 Cell Counting Kit，这个试剂盒是基于WST-8，广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测。与MTT类似，对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目在一定范围内呈线性关系。

cleargreat

检测细胞增值常用的方法：1细胞计数，2MTT，3CCK8，4就是CFSE上流式，检测细胞周期

naturehu

MTT和流式用的比较多。

scarletkiki

MTT CCK8 流式 最古老的细胞计数