用什么牌子的淋巴分离液分离脐血单个核细胞？

小梓莜

回复 mania7041 的帖子- u5 _% F6 R" B8 p4 A- h4 _
1 Y+ s6 K1 ^) D& V, Q' E! x; T% o
想问下你那边脐带血一般放置多久进行分离？分离的效果如何，单个核细胞数目多少？谢谢参与讨论~

hk456

我们用的是天津浩洋的 效果不错  

小梓莜

回复 hk456 的帖子2 I* u5 Z. j' Z& v5 C1 o

( C' Y3 D, v9 J+ \. z/ r* I1 x' F谢谢回复~~

lt595370417

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6 q# w, s, }4 M2 G6 f6 I1 E$ ]3 a4 \3 Y( M: H4 O. d8 N
我们都是用20ml的分离液加上25ml稀释过的血液分离，你这个是不是比例有点问题......而且脐血时间放的确实有点长

chenlin080102

分不出来的原因很简单，并不是分离液不好的原因，而是脐血跟外周血存在本质的区别，我之前也是做不出来，现在优化工艺后已经解决这个问题了，因为脐血里面含有大量未成熟红细胞，这部分红细胞密度很小，所以正常方法是离心离不下去的

Ivan0108

回复 小梓莜 的帖子1 O& I7 F, b8 L/ O( _8 c

: t, b3 {6 ^1 r: m! R9 Q) _1、存放时间久的血液，分离效果比较差。而且后期细胞培养难度也比较大，主要是增殖少。# a4 z/ V" K: G7 M0 b+ r
2、一般都使用天津灏洋的就可以了，实验级就可以，不会检测内毒素超标的情况。
( O3 _5 |1 N+ n! \! x3、分离效果也与血液有关，有些人血液血脂比较高，分离时效果也会不好，而且会掺杂许多红细胞。7 i" U  {8 r* _- O# |! `: l
4、如果要得到比较纯的PBMC，可以参考先采用羟乙基淀粉沉降红细胞再上淋巴分离液，这样效果很好。就是得率可能稍微低一点。

chenguangyu

天津TBD

小梓莜

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# X0 d# L* y8 `! W: v' t5 [% _
4 t6 ^6 `' ?2 Q您好！我目前离心效果好了点，留在白膜层中的红细胞减少了很多，剩下部分会再用红细胞裂解液裂解，不知您那边是如何优化的呢？改变离心转速？还是延长离心时间？谢谢您的指教。

chenlin080102

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) Q5 U' T* @- v: Q  M) n; K
其实要从根本找原因，最重要的原因不是分离液，而是脐血本身的特性，你可以上网查查脐血与正常外周血的区别，然后网上能找到很多关于一些分离脐血的经典方法

chenlin080102

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, Z" ]  y! v! v% H; m6 S还有就是脐血红细胞对红细胞裂解液不敏感，基本上没什么反应，我这边尝试的是这个结果，因为脐血的红细胞与外周血红细胞特性不一样