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楼主: hottodeath
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请教:这个是我用无血清培养的MDA-MB-231,这个是球吗?用231富集可行吗?   [复制链接]

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发表于 2015-4-28 09:15 |只看该作者
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. j4 r! ^2 q6 z, S( n3 @; R) ]7 C  \
前辈还真点醒了一下我,确实我的目的是要获得干细胞样细胞的亚群,如果重复做了比例还是差不多,我试着多分一些看看能不能做后续的实验。
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发表于 2015-5-8 14:05 |只看该作者
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+ I! c; v( n% ]0 n
7 s$ l/ Q, h9 v8 M+ h0 h好像最近nature有篇文章讲如何验证的。估计很多公司也开始做了
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发表于 2015-5-8 14:19 |只看该作者
本帖最后由 hottodeath 于 2015-5-8 14:23 编辑 1 P5 [  H; F6 D- j

( K) ?) J* [2 O8 n) r
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发表于 2015-5-8 14:32 |只看该作者
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上面是我换了一株MCF-7重新养的,培养基配方还是一样。先用的细菌培养皿(有少部分是悬浮的,摇不动的也是圆的),1天,请前辈们看看这个像你们养出来的sphere吗

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发表于 2015-6-20 20:41 |只看该作者
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# n7 ~, o" [4 z7 c- U3 B6 H- }: K- t3 d' F# c( q7 `5 x- e4 S, ]) k# u
你好,我也在养球,球也形成了,但是有很多细胞碎片,请问怎么把球分离出来?
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发表于 2015-6-23 13:53 |只看该作者
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0 t. Z7 J% }& }& K6 |
0 }  k2 A( U( U9 [& l建议你发新帖提问

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发表于 2015-6-23 14:38 |只看该作者
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0 H1 a/ |% a* O8 `' t4 S+ ~- o4 g" J( u  q( f8 n
球和细胞碎片好区分的话,用细胞筛就行。我养的MCF-7,死细胞及碎片相对球要少得多就没去管它,只传代离心弃上清这一步主要去除。只是流式做了几次,都没出CD44+CD24-的,不知道是养细胞出了问题还是流式前的操作不行。另我用的invitrogen的accutase,感觉好难消化啊
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发表于 2016-2-24 10:42 |只看该作者
请问一下你的肿瘤球培养条件和接种密度是多少啊?我养的肿瘤球不成球。不过我测过231,CD44+CD24-有70-80%。
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发表于 2016-2-24 11:03 |只看该作者
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