大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

风倾颜

1.我们都是FBS：DMSO=9:1冻存，每管也用不了多少FBS，细胞复苏的时候一直挺好的
$ y' h# f) R. [9 u% _& }: A) N2.可以适当的提高一下冻存的细胞的浓度
; \. \% i- K9 f& Q' G7 [3.如果冻存的时候要用培养基，不建议加双抗

sfnana

1）FBS：DMSO=9:1冻存，这个活率是最好的，因为血清中蛋白能够保护细胞，降低DMSO对细胞的毒害作用，所以血清的浓度不能太低，如果你想节约点，试试50%的血清浓度，最好还是根据你的细胞状态，做一个梯度对比，然后得出最佳的血清浓度比。. s" L* c1 J! [4 r
2）保证血清的质量，最好选择进口的胎牛血清，这样你少加点，复苏活率也会很好的。
( _7 _. N. [) |2 O$ D! T! A3）另外，你还要考虑一下你冻存之前的细胞状态，这对冻存后复苏影响也很大。

bubble_w

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( E: j+ h6 `! u- W5 ]( t! D  i% `' q! M* F1 m
冻存液的比例不是重点，关键是冻存时降温的速度，在-20°至-60°的过程中，细胞内最容易形成冰晶，影响复苏后细胞的活力。最佳的降温速度是-1°/min。你的细胞复苏后不贴壁，有可能是细胞冻存的时候状态就不好，还有就是冻存的降温速度和复苏时的速度问题。还有复苏的时候，复苏液的选择、用量和温度也很重要。总之就是慢冻速溶。

ltickp

DMEM：FBS：DMSO=5:4:1，细胞复苏后活率基本在80%以上

liuyanly35

血清可以再稍微提高一点点，再就是冻存的密度也都很重要。

田甜

; K( d* l* b1 `0 v, W, |" w- _
DMEM:FBS:DMSO=7:2:1，这个比例冻干细胞没问题啊，我一直用这个，细胞正常。
  d: }3 h2 J0 E/ @4 T, O' B问题可能要从冻存程序和复苏操作上找。复苏时，水浴温度可设置在39℃，尽量快点解冻，当看到冻存管内还剩绿豆大小的冰时，拿出来继续摇一摇就可以了。解冻时间长了，对细胞有较大的影响。

ltickp

DMEM：FBS：DMSO=5:4:1