BM-MSC状态不佳啊

yiwuya007

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0 @. h$ C' V  y7 I2 A! n0 v1 W5 r8 s3 i1 n! Z4 h: R6 C
没有拍照，因为正常生长的，所以就没有拍啊。
2 l- h  \1 s8 _& i" [! \5 ]) ~胰酶都是经过1：5稀释过用的，1-2分钟消化。3 ~! A; v( D7 A
细胞在两个培养箱中培养的，都变成这个样子了。
! c2 b3 e: O' \3 k& L8 e现在唯一想到的就是消化过度或者传代太晚or太早？0 [; W' a# l9 H1 k& U4 M

watchen198891

你传代前有照片吗？你消化的方法没有问题，传代太晚是有可能的，还是检测一下你的细胞是否存在污染或者其它问题。

素心无痕

有可能是当初接种密度过低，细胞老化比较严重。

yiwuya007

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+ ?* Q7 c) K, K, a/ ~& o- P8 M% X4 |- T1 U7 s" t9 H$ |
这个是P0代的，以后的没有拍照。

yiwuya007

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; d" W7 |2 H4 [! L
( S$ c6 {' A: m1 q3 w9 N- P确实是在P1代时，有1皿密度低了，4-5天才长满，但是其他的还行，2-3天就长满了。现在是所有的细胞都这样了。

tess1029

这是老化了呀

yiwuya007

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  t1 v8 X) O; p/ x- g
$ I( g' M8 c( E& k/ r8 M& ]是老化了，但是不应该这么快啊，才传两代，也不知道这次问题在哪里。

tess1029

  O) R* ]/ [+ e% O: E7 J( |

) \# _  j% J2 T; H% R/ M回复 yiwuya007 的帖子
) d; U5 m  `# V) i, ^% E( r  b
7 h) H9 ]- o0 p1 v4 G% c没加因子、血清不好使或者传代时密度太大了已经老化了，又或是胰酶消化太久了

nkcell

你换一家血清看看，最好是专用的培养MSC的培养基，还有血清浓度不要超过10%，还有就是细胞现在增殖的速度怎么样，如果增殖速度不变应该可以排除支原体污染

yiwuya007

回复 nkcell 的帖子& S# y  ~% U5 D4 N; ~( r! ?$ K0 A( b

2 _$ ~- z! i  Y. f( U! W' r  i血清是Hyclone的，一直是10%