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CIK培养过程中出现絮絮的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-5-5 15:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问在脐血CIK培养过程中,出现大团的白色絮絮,显微镜下看是细胞团,该如何处理?我曾经试过吹散,但是即使当时吹散,但后来又会聚集成团,并且会导致细胞的增殖缓慢;第二种方法是静置一会儿,待大团絮状物沉到管底,就把上清液倒回原来的培养瓶,去除沉淀,但是是不是由于去除沉淀的同时损失很多细胞,后期细胞增殖也很慢,求大神解惑!
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沙发
发表于 2015-5-5 15:44 |只看该作者
细胞结团很正常啊,定期晃动应该就好了
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藤椅
发表于 2015-5-5 15:55 |只看该作者
回复 20084720113 的帖子
! W. h# k) l8 R9 W6 C( v- G+ I; j1 }3 v: x# v- `% E4 v' k
不是正常的那种结团,后期一直有,不会散开,你们的细胞团后期会没有了吗?

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板凳
发表于 2015-5-6 08:27 |只看该作者
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回复 lxy07 的帖子
' L3 h% q! R7 v9 s- }8 W5 l2 d2 D% E
做个真菌检测看看!如果不是,那就考虑下你所用的方法及所加因子的种类浓度问题
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2015-5-6 08:37 |只看该作者
回复 lxy07 的帖子
  _9 l1 S" q$ p  V5 ?  H5 [+ m/ u+ e" c- g7 X0 l$ z- ~3 L
是死细胞团,可以试试尽可能吹散,然后滤网过滤掉絮状物,用孔径稍微大点的滤网
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地板
发表于 2015-5-6 09:39 |只看该作者
通常我们的做法是,先吹散,如果吹不散就用滤网过滤掉细胞团,细胞活率数量等还能挽回
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发表于 2015-5-6 10:21 |只看该作者
本帖最后由 aochongyu 于 2015-5-6 10:23 编辑 5 n) x$ @- h9 u
! x" v7 {6 R2 i
脐血很容易发生这种情况,小的话直接吹开,要是细胞团很大(占据四分之一的T175瓶子左右时),并且真菌和内毒素检测没事的话,可以直接由100um过滤网过滤,去除死细胞团,一般可以正常增值,毕竟脐血起始量很大啊
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发表于 2015-5-7 11:26 |只看该作者
我们也发生过这样的问题,分析觉得应该是细胞前期补液不及时,后期就容易出现成团絮状的现象,建议前期及时补液,每天多次摇匀细胞
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发表于 2015-5-9 14:08 |只看该作者
我们也发生过这个种情况,分离单个核细胞时第二天有时候会出现还有就是冻存复苏第二天会出现,可以把絮状团挑到,也可以不用管它后期他会自己慢慢消失了
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发表于 2015-5-15 10:55 |只看该作者
CIK细胞培养如果自体的,细胞培养时开始阶段个体差异好大,我们这有些病人的细胞直接下面结成一层胶状,成团,絮状是常有的事,不用担心,养到10多天就消失了
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