脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了

小跑

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外周血的能培养到一百亿个，一样的培养体系

小跑

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" m! A  V: s+ D9 _2 T7 s+ K9 V7 t我培养的几乎都是前一周长的很好，甚至比外周血还好。后期就不长了，只有十分之一的一直都培养的很好

小跑

回复 spring1221 的帖子; R  n. J; f$ d# w; G; J- E2 B+ z
- j7 P. H. }1 }1 |/ [& `
脐血的量我们也是一直要求多采，但是毕竟不能自己参与，每次的量都不理想。补液时机是没问题的。你说的我明白，细胞有一个旁分泌效应。一般情况下我们是两天一补液，但如果细胞长的快，培养基明显变黄，那就不会等两天才补液。

小跑

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- Z0 z! [+ x3 L/ {0 o2 q2 P5 R/ g' G2 h; n9 y
初始量一般5*10^7是有的，脐血量虽少，但淋巴细胞、单核细胞的比例还是较高的，所以提取的细胞也还可以。
) o+ E$ k5 l8 U. C5 x+ |/ H外周血我们用肝素钠和枸橼酸钠抗凝都用过，都可以正常培养。

zhrt

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/ j4 v- {# a) b9 k你培养脐血来源的有几例？每一例都这样吗？

小跑

回复 zhrt 的帖子( L4 A3 v) V+ ?& X' p+ o, Q
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培养了大概十来例，只有一例效果很好，比外周血还好。其他的都有问题。

小跑

看到有的人培养CIK到第七天再次补加CD3单抗，50ng/ml，这样做单抗用的太快了。

zhrt

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) s8 T9 r. p. ?) ]. e0 b+ g- ~" w" R! g+ f
这样可以排除染菌的可能性。加血清没有？前期浓度怎样，血清加多了容易老化的，还有就是加液的时机，细胞的密度怎么样？再有做个流式看看培养出的细胞表型，以排除非CIK!

Ivan0108

脐血细胞生长不好几个原因：
4 E  x& N( H2 A* N+ J  T1、枸橼酸钠抗凝剂采血没有什么大的影响，关键是采血时间带分离不能超过12个小时，5小时以内最好。! C5 t6 N4 ]8 s4 p, f; f
2、采血量建议增加，加抗凝剂一起70-80ml为宜。低于50ml的一般很难培养起来，除非采血时间在5小时以内。1 U- C" {9 W4 r( x
3、细胞接种密度，一般推荐2-3*106/ml最好，接种密度太低会导致细胞生长不良。0 S: C) p9 O. F) T; d, _+ T: k5 K, o, a
4、目前推荐使用培养基种类：gibco、lonza  ，美天旎，corning，日本研究所ALY等细胞均可正常生长。
9 L1 y( J7 m. {4 D, Y. Q5、细胞装袋、加液密度：刚开始接触，建议装袋前测密度 保证装袋后细胞密度在0.3-0.8就可以了。 每次加液时，建议计算密度，保证加液后细胞密度维持在1.0-1.5最好。

momoenn

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9 C, d$ O: u6 H3 P: \: }同意