脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了

小跑

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( K. U" p& s8 m5 G' ]外周血的能培养到一百亿个，一样的培养体系

小跑

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我培养的几乎都是前一周长的很好，甚至比外周血还好。后期就不长了，只有十分之一的一直都培养的很好

小跑

回复 spring1221 的帖子5 C# t7 o2 C- J, B, [; j: S
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脐血的量我们也是一直要求多采，但是毕竟不能自己参与，每次的量都不理想。补液时机是没问题的。你说的我明白，细胞有一个旁分泌效应。一般情况下我们是两天一补液，但如果细胞长的快，培养基明显变黄，那就不会等两天才补液。

小跑

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: b, k. \9 j0 c) j& F$ v9 v6 S
7 H0 G% q7 t  S% P- s  _7 x, I初始量一般5*10^7是有的，脐血量虽少，但淋巴细胞、单核细胞的比例还是较高的，所以提取的细胞也还可以。( t  }/ R! e* ~2 b! e
外周血我们用肝素钠和枸橼酸钠抗凝都用过，都可以正常培养。

zhrt

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1 _- P/ p$ q+ B
  \5 Y0 i" F2 S5 ?# h; V7 }你培养脐血来源的有几例？每一例都这样吗？

小跑

回复 zhrt 的帖子0 p6 j& \$ y5 C7 o0 x7 @  p. H
$ F, i7 j6 F4 r& m
培养了大概十来例，只有一例效果很好，比外周血还好。其他的都有问题。

小跑

看到有的人培养CIK到第七天再次补加CD3单抗，50ng/ml，这样做单抗用的太快了。

zhrt

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- Z7 D3 u9 K$ J4 a
5 }; u0 D+ C7 \这样可以排除染菌的可能性。加血清没有？前期浓度怎样，血清加多了容易老化的，还有就是加液的时机，细胞的密度怎么样？再有做个流式看看培养出的细胞表型，以排除非CIK!

Ivan0108

脐血细胞生长不好几个原因：3 U0 M. Y: N3 j+ N0 i! R# Z; u  [+ Y
1、枸橼酸钠抗凝剂采血没有什么大的影响，关键是采血时间带分离不能超过12个小时，5小时以内最好。- K3 _( m5 {' b+ j" m
2、采血量建议增加，加抗凝剂一起70-80ml为宜。低于50ml的一般很难培养起来，除非采血时间在5小时以内。
, B3 g8 |- Y& P. Y% k* C3、细胞接种密度，一般推荐2-3*106/ml最好，接种密度太低会导致细胞生长不良。; _5 v7 d) U: M/ G
4、目前推荐使用培养基种类：gibco、lonza  ，美天旎，corning，日本研究所ALY等细胞均可正常生长。9 T" z3 J2 B9 H3 Y" s! a; Z7 S
5、细胞装袋、加液密度：刚开始接触，建议装袋前测密度 保证装袋后细胞密度在0.3-0.8就可以了。 每次加液时，建议计算密度，保证加液后细胞密度维持在1.0-1.5最好。

momoenn

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同意