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楼主: 冬天的雪糕
go

求助ips复苏的问题 [复制链接]

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发表于 2015-7-15 16:03 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子5 J! A( G4 W. ~- N$ e" Z  I5 K
4 ^8 g/ p& u1 x( G6 b! p
我还想请问一下,y27632是用ddh2O溶解吗?浓度多少呢?还有就是10ml培养基的话加入多少y27632比较合适呢?谢谢

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发表于 2015-7-15 16:25 |只看该作者
回复 冬天的雪糕 的帖子' R# l# ^! ?+ O0 y$ X2 v
! P* W! D1 Y+ e% G! ^3 u1 s
这个到不是很清楚,一般来说ips克隆足够大了就直接传代或者冻存,至于MEF能够支撑多久我没有注意,ips克隆到一定程度很容易出现分化。我觉得MEF不能够长期支持ips生长,要是你的ips长时间不能够形成克隆状态,那你的细胞应该要检查一下。
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发表于 2015-7-15 16:26 |只看该作者
回复 冬天的雪糕 的帖子
$ o- R- o/ R6 `6 x2 P% y! I9 E& H% e4 T' u$ {! e1 n
血清加10%的DMSO或者培养基加30%血清再加10%DMSO。我这样用的,效果还行。血清太贵,后面就改用培养基来代替。复苏的时候没有多大的问题。
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发表于 2015-7-15 18:17 |只看该作者
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回复 冬天的雪糕 的帖子% t4 i1 k7 ~0 r+ l
9 D* @* b6 Y. _- A- \4 q
用DMSO溶解,配成母液,用的时候加入培养基中,终浓度为10uM即可。
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