求助ips复苏的问题

冬天的雪糕

回复 nichifanlema2 的帖子$ H0 u# O$ e" {2 Z' G0 ~5 g

2 y4 a) C$ ]( o  K7 _我还想请问一下，y27632是用ddh2O溶解吗？浓度多少呢？还有就是10ml培养基的话加入多少y27632比较合适呢？谢谢

watchen198891

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这个到不是很清楚，一般来说ips克隆足够大了就直接传代或者冻存，至于MEF能够支撑多久我没有注意，ips克隆到一定程度很容易出现分化。我觉得MEF不能够长期支持ips生长，要是你的ips长时间不能够形成克隆状态，那你的细胞应该要检查一下。

watchen198891

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5 s: Q6 Q: d& Q& X1 {% S血清加10%的DMSO或者培养基加30%血清再加10%DMSO。我这样用的，效果还行。血清太贵，后面就改用培养基来代替。复苏的时候没有多大的问题。

nichifanlema2

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8 J, }1 Y: B1 ]4 m1 r1 `6 _. I! e  K8 r7 _+ r6 N* `- L; k9 d3 r7 W
用DMSO溶解，配成母液，用的时候加入培养基中，终浓度为10uM即可。