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楼主: 冬天的雪糕
go

求助ips复苏的问题 [复制链接]

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发表于 2015-7-15 16:03 |只看该作者
回复 nichifanlema2 的帖子$ H0 u# O$ e" {2 Z' G0 ~5 g

2 y4 a) C$ ]( o  K7 _我还想请问一下,y27632是用ddh2O溶解吗?浓度多少呢?还有就是10ml培养基的话加入多少y27632比较合适呢?谢谢

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发表于 2015-7-15 16:25 |只看该作者
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. u* q) v% [9 L- R& _  P5 h1 [8 r1 Q2 G) K) h
这个到不是很清楚,一般来说ips克隆足够大了就直接传代或者冻存,至于MEF能够支撑多久我没有注意,ips克隆到一定程度很容易出现分化。我觉得MEF不能够长期支持ips生长,要是你的ips长时间不能够形成克隆状态,那你的细胞应该要检查一下。
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发表于 2015-7-15 16:26 |只看该作者
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( r, [" T2 v7 ]8 O
5 s: Q6 Q: d& Q& X1 {% S血清加10%的DMSO或者培养基加30%血清再加10%DMSO。我这样用的,效果还行。血清太贵,后面就改用培养基来代替。复苏的时候没有多大的问题。
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发表于 2015-7-15 18:17 |只看该作者
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8 J, }1 Y: B1 ]4 m1 r1 `6 _. I! e  K8 r7 _+ r6 N* `- L; k9 d3 r7 W
用DMSO溶解,配成母液,用的时候加入培养基中,终浓度为10uM即可。
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