求助ips复苏的问题

watchen198891

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, ^( i7 `0 P6 `4 F. D
我也没有加y27632，细胞可以吹散，但是只能轻微吹打，不能反复吹打，有的时候我基本不吹打，手指弹几下，沉淀飘起来就直接加入培养皿中了。离心的话就800rpm，3min。培养基更换一般第一天观察一下，如果液体变黄或者克隆长出较多则换液。我是这样做的，细胞状态还可以。

wangshumin12311

为嘛一定feeder养，，，

冬天的雪糕

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; ~6 M; R; L$ I非常感谢您细心的解答！5 S3 U  ?7 G( f# L; z( d
请问除了y27632还有什么可以提高复苏率吗？mef密度问题，一个t25大概多少比较合适呢？

nichifanlema2

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7 e" m8 [3 D. a4 [0 d4 U9 B8 Q
& ~% b8 V" [& m常用的就是Y27632,。关于feeder密度，T25培养瓶可以复苏50-80万feeder。

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子& O% ?% }, e! U# J, {) T" ^

  [5 U! U; y) f谢谢。feeder的话，是不是一般一周就要更换新的，请问你一般复苏后多久就传代了呢

冬天的雪糕

回复 wangshumin12311 的帖子
. A/ V, ]: O; I
( \3 W- }2 ?  U, G' h# _+ q# ]5 u9 e" P比较省钱，嘿嘿

冬天的雪糕

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2 X; X! H3 ]) ~0 ?2 K* ~; D: x) x  Y( S) U2 E
非常感谢
9 S8 m- l' f! x, C+ L3 {8 ~# s8 D

watchen198891

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  u) R6 P0 m- l, x! J5 m1 {
, a- ]  D% a' E* I& t) xMEF更换是什么意思？是说你铺好没有用可以放多久吗？还是你准备传代的时间？iPS传代时间一般跟你克隆大小确定，当然如果养得比较好的话基本两天就会传代。

冬天的雪糕

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9 c& Z; j* T7 j& B4 V- v我的意思是mef最多可以支持ips生长多久呢？好像听说最多不能超过一周是吗？

冬天的雪糕

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9 o. ]: S- z# H% q, E  a
+ O+ A1 `, I* `( F- K0 k$ S. g还有请问你的冻存液配方是什么呢