求助ips复苏的问题

watchen198891

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8 O9 T% |/ I: m4 F- J% T0 i
我也没有加y27632，细胞可以吹散，但是只能轻微吹打，不能反复吹打，有的时候我基本不吹打，手指弹几下，沉淀飘起来就直接加入培养皿中了。离心的话就800rpm，3min。培养基更换一般第一天观察一下，如果液体变黄或者克隆长出较多则换液。我是这样做的，细胞状态还可以。

wangshumin12311

为嘛一定feeder养，，，

冬天的雪糕

回复 nichifanlema2 的帖子
1 h. N4 v4 x; `$ Z6 c
5 B2 q5 L: h5 E5 S* r$ t# k非常感谢您细心的解答！  r6 e+ n9 n# u
请问除了y27632还有什么可以提高复苏率吗？mef密度问题，一个t25大概多少比较合适呢？

nichifanlema2

回复 冬天的雪糕 的帖子( s; c. f9 x/ Y
8 C. o+ {2 ]* Y: g. a; e* o
常用的就是Y27632,。关于feeder密度，T25培养瓶可以复苏50-80万feeder。

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子! E' ]% i) L5 ~9 v
+ G% e8 z6 x/ O3 }+ y- p% J
谢谢。feeder的话，是不是一般一周就要更换新的，请问你一般复苏后多久就传代了呢

冬天的雪糕

回复 wangshumin12311 的帖子
: d# [- @9 p) E# M8 o* ]) y$ e, L+ G7 {4 V
比较省钱，嘿嘿

冬天的雪糕

回复 nichifanlema2 的帖子$ w$ n3 a8 `) [# Y$ [  W1 `+ `" ~0 A

' R  a  t8 g8 q( i- z6 C8 x非常感谢
) U, f9 \4 c. |' w5 S" K

watchen198891

回复 冬天的雪糕 的帖子6 r, e: S" w% K% b1 R

" H' I4 i8 K6 s7 g) S6 aMEF更换是什么意思？是说你铺好没有用可以放多久吗？还是你准备传代的时间？iPS传代时间一般跟你克隆大小确定，当然如果养得比较好的话基本两天就会传代。

冬天的雪糕

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. @% w, d" S. |" W
" M$ `) r5 U& K我的意思是mef最多可以支持ips生长多久呢？好像听说最多不能超过一周是吗？

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子* |1 B8 s3 J! \1 y9 R

% O. b, \; ~* |还有请问你的冻存液配方是什么呢