求助ips复苏的问题

watchen198891

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; \) M$ \+ [8 l  f6 @7 O我也没有加y27632，细胞可以吹散，但是只能轻微吹打，不能反复吹打，有的时候我基本不吹打，手指弹几下，沉淀飘起来就直接加入培养皿中了。离心的话就800rpm，3min。培养基更换一般第一天观察一下，如果液体变黄或者克隆长出较多则换液。我是这样做的，细胞状态还可以。

wangshumin12311

为嘛一定feeder养，，，

冬天的雪糕

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( k% C( i. Z* D- Q& h  D+ w! d! o# ~% N6 d, W8 {& Z" q; I
非常感谢您细心的解答！5 G1 R, P1 I8 v2 A6 y9 v
请问除了y27632还有什么可以提高复苏率吗？mef密度问题，一个t25大概多少比较合适呢？

nichifanlema2

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- x# w3 i& X* l6 B0 W6 t* v. t- d+ g
常用的就是Y27632,。关于feeder密度，T25培养瓶可以复苏50-80万feeder。

冬天的雪糕

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- r( u3 v% m, ^# Z
& b2 a6 X3 N) \8 l谢谢。feeder的话，是不是一般一周就要更换新的，请问你一般复苏后多久就传代了呢

冬天的雪糕

回复 wangshumin12311 的帖子4 J7 q6 N6 q* D# ~

! m/ j5 \9 Q! F" w比较省钱，嘿嘿

冬天的雪糕

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! c' y* X) X5 _' h% M0 h7 I2 k
/ F4 Q, E' _( ]; ]1 C$ C非常感谢# z9 C$ z$ |  b7 d# T; u, y8 A

watchen198891

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5 \! F3 w6 r" {1 \  N% P3 z3 N4 M; z* t6 A
MEF更换是什么意思？是说你铺好没有用可以放多久吗？还是你准备传代的时间？iPS传代时间一般跟你克隆大小确定，当然如果养得比较好的话基本两天就会传代。

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子& m8 q6 A. n, Q1 M$ ?& ]  R

/ ]0 G0 I/ a% I0 o9 k5 N8 m$ n9 f我的意思是mef最多可以支持ips生长多久呢？好像听说最多不能超过一周是吗？

冬天的雪糕

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9 C& t- X" }9 B3 C还有请问你的冻存液配方是什么呢