求助ips复苏的问题

watchen198891

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9 ?- U2 l9 X2 ^8 I7 u我也没有加y27632，细胞可以吹散，但是只能轻微吹打，不能反复吹打，有的时候我基本不吹打，手指弹几下，沉淀飘起来就直接加入培养皿中了。离心的话就800rpm，3min。培养基更换一般第一天观察一下，如果液体变黄或者克隆长出较多则换液。我是这样做的，细胞状态还可以。

wangshumin12311

为嘛一定feeder养，，，

冬天的雪糕

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. w5 R" r$ `9 T: W! V% W! ^! u, [9 p& G5 e( d- h
非常感谢您细心的解答！
; E! A" f  c" U8 H% u- v6 Q# K请问除了y27632还有什么可以提高复苏率吗？mef密度问题，一个t25大概多少比较合适呢？

nichifanlema2

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, J# R0 c  C9 U) k  b# q
" s, H/ g. G6 K6 B! G常用的就是Y27632,。关于feeder密度，T25培养瓶可以复苏50-80万feeder。

冬天的雪糕

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( C" g+ W9 x4 R4 ^7 w2 o: n
' H' ?4 m3 N8 d/ B& Z, ?0 K谢谢。feeder的话，是不是一般一周就要更换新的，请问你一般复苏后多久就传代了呢

冬天的雪糕

回复 wangshumin12311 的帖子2 F" P, `  U" d5 t2 {$ t

& `% O' A8 s# y4 w# u& U3 ~比较省钱，嘿嘿

冬天的雪糕

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/ T2 s9 C1 c; l% D, h! B( w0 _8 y) A4 x4 ^; V& P! J/ X% n6 y
非常感谢
/ E; f$ o; ~( U2 C

watchen198891

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6 X8 J5 I" ~0 E$ b! d7 e* r9 a$ i
3 ]0 ~% J/ Y' v- Z, d1 ^MEF更换是什么意思？是说你铺好没有用可以放多久吗？还是你准备传代的时间？iPS传代时间一般跟你克隆大小确定，当然如果养得比较好的话基本两天就会传代。

冬天的雪糕

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+ G: f7 U' T6 p3 \. E& I# d# F$ \0 ~8 U9 p& {& O; H, ]
我的意思是mef最多可以支持ips生长多久呢？好像听说最多不能超过一周是吗？

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子/ P9 ~# `% v- a

; q0 [2 {1 `. [5 O" }0 j还有请问你的冻存液配方是什么呢