求助ips复苏的问题

watchen198891

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3 F3 G! d. T  |0 z# H+ D" a8 J5 Z: d5 V0 ~+ G9 `
我也没有加y27632，细胞可以吹散，但是只能轻微吹打，不能反复吹打，有的时候我基本不吹打，手指弹几下，沉淀飘起来就直接加入培养皿中了。离心的话就800rpm，3min。培养基更换一般第一天观察一下，如果液体变黄或者克隆长出较多则换液。我是这样做的，细胞状态还可以。

wangshumin12311

为嘛一定feeder养，，，

冬天的雪糕

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: E% }/ X7 l' F$ Z7 @$ N# B3 D; I; e$ F5 p* b4 A
非常感谢您细心的解答！+ B/ K' Y' x9 b$ i2 o
请问除了y27632还有什么可以提高复苏率吗？mef密度问题，一个t25大概多少比较合适呢？

nichifanlema2

回复 冬天的雪糕 的帖子2 z( X5 }& a, v, _

8 w0 h1 Q. K/ r常用的就是Y27632,。关于feeder密度，T25培养瓶可以复苏50-80万feeder。

冬天的雪糕

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0 O( J! L3 U+ X" D+ ?, W
% W( _- {- b' u* }谢谢。feeder的话，是不是一般一周就要更换新的，请问你一般复苏后多久就传代了呢

冬天的雪糕

回复 wangshumin12311 的帖子
& }; ]  \) X* J6 R
0 f$ o" L7 J) Z6 x/ b+ d比较省钱，嘿嘿

冬天的雪糕

回复 nichifanlema2 的帖子2 O  m% C/ j- u6 ]$ G
- d* M' F  C) G
非常感谢- T; ]( C, T% {$ W) K. w. C

watchen198891

回复 冬天的雪糕 的帖子6 L- @6 I2 Q6 y3 v5 i# f
3 r0 z; H" D+ S3 L+ Y
MEF更换是什么意思？是说你铺好没有用可以放多久吗？还是你准备传代的时间？iPS传代时间一般跟你克隆大小确定，当然如果养得比较好的话基本两天就会传代。

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子( S% h, q- I- H7 w3 A

7 ~1 f( V. ^: ~我的意思是mef最多可以支持ips生长多久呢？好像听说最多不能超过一周是吗？

冬天的雪糕

回复 watchen198891 的帖子) P6 o) C" X1 ?# ^  E2 C9 J
, k- @$ f# ^3 d  o9 q7 _8 n
还有请问你的冻存液配方是什么呢