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楼主: chrindy
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脐带间充质干细胞难以消化   [复制链接]

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发表于 2015-7-16 11:12 |只看该作者
把含血清的细胞都好好洗洗,把酶放到水浴锅预热一下,如果这些都不行,就是细胞分泌了一些因子,把细胞贴住了,消化时间加长就行了
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发表于 2015-7-16 12:17 |只看该作者
回复 nkcell 的帖子" R! G5 Q" A* Y) s% g, F1 Z2 w

2 Z# W# p( y: R7 P$ H+ ^0 @没怎么延长消化时间,可是消化下来的细胞状态也不好,加了生长因子也长好慢,还有一瓶开始长肥,怀疑究竟是不是MSC了
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发表于 2015-7-17 11:39 |只看该作者
组织状态挺好的,加上适合的培养基一定能长出来的
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发表于 2015-8-23 07:18 |只看该作者
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可以将胰酶先放37度孵育几分钟,37度酶活是最强的。
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发表于 2015-8-23 09:36 |只看该作者
回复 chrindy 的帖子' P& O) T+ J# l# O. |

  o! L+ F7 K! A# \你好,我可以看看你的干细胞图片吗,我最近也养了,发现有好的圆形细胞里面,不知道怎么弄,谢谢

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发表于 2015-8-25 10:23 |只看该作者
脐带间充质干细胞是很好消化的,遇到难消化的情况有以下几种情况,首先确认在消化前是否将培养液冲洗干净,假如有残留的培养液的话对消化有一定的抑制作用,会导致消化很慢,你可以不加一些胰酶看看那是否消化有所改善,其次就是细胞分化后和一些杂细胞本身就很难消化,这就需要你自己做下鉴定了!希望解决后和大家分享下经验啊!
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发表于 2015-8-25 11:29 |只看该作者
1.有可能是酶的问题
# U: f+ G& F6 z& {& w6 Q2.细胞不是间充质; |: y% u5 C  E; p0 \9 y
3.如果以上两点排除,那就是培养瓶的问题,同样的细胞培养到不同的瓶子里消化的速度不一样
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发表于 2015-8-25 14:40 |只看该作者
确定一下你胰酶保存是否合理,这个要现用现化的、- S1 p7 `0 d  T3 _
你的细胞形态如何?如果形态很差也是不好消化的。
1 |# p5 D3 c5 l0 P, d( W4 [正常MSC挺好消化的
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发表于 2015-8-25 15:28 |只看该作者
回复 ych123 的帖子
3 Y2 y3 x3 Q$ ^0 E; ^0 [0 }
6 P- R2 A9 S' |2 c5 ^0 [我最近养的细胞状态都不怎么好啊,你是自己提的MSC吗??圆形细胞可能是杂细胞??我同学之前试过同时养两种细胞,可能操作的时候没注意,感觉另一种细胞混进MSC里面了,养着养着MSC就被那种细胞淘汰了...
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发表于 2015-8-25 15:30 |只看该作者
回复 帝国黑骑士 的帖子1 {7 l8 s  n+ T! A3 n! K# ]

' y( e/ [7 E; z3 z8 Z$ p1 ~# `一般我都是用0.05%胰酶消化也挺容易的,这批不好消化的MSC后来长得很慢,开始变肥大,感觉可能是我有一次差不多长满才传代所以后面状态都不好了,真的不能抱有侥幸心理啊...
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