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CIK细胞培养补液   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-7-14 09:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我是一个新人,现在刚接触CIK细胞培养,在培养过程中,第0天T-175培养瓶30ML培养基LONZA,细胞接种量是10的8次方,第三天全量换液,之后转入培养袋,,以后补液量根据什么啊,哪位大神可以告诉我啊?求赐教。
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沙发
发表于 2015-7-14 10:32 |只看该作者
细胞的培养密度、培养基消耗,一般2-3天患液
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藤椅
发表于 2015-7-14 10:32 |只看该作者
回复 snowny007 的帖子6 @3 U8 B3 g2 X3 S+ v+ v9 X
5 X! K1 F; X0 Q6 q% Z% E6 x! z
补液不是患液

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板凳
发表于 2015-7-14 13:24 |只看该作者
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好东东

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报纸
发表于 2015-7-14 14:14 |只看该作者
cik是悬浮细胞,不用换液吧,一般都是补液
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2015-7-14 16:12 |只看该作者
第0天T75培养瓶30ML培养基,细胞接种量是10的8次方,接种密度很高。
+ t- m5 x" {) R: L) M第三天全量换液不知为何,CIK一般不需要换液,直接补液即可。
6 c3 E' D; b7 q3 L: o转入培养袋时间也过早。; @- o/ B" ~" X7 I- l
培养流程不科学。当然也许你方法独特,不做过多评价,加油!
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发表于 2015-7-14 17:23 |只看该作者
首先很感谢大家的经验回答,我也不太懂,CIK细胞不换液的道理是什么呢?补液量跟细胞密度怎么掌握啊?有没有文件性的东西可以发我参考吗?或者是可以把你们的培养补液流程发我吗?非常感谢!
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发表于 2015-7-15 09:15 |只看该作者
因为CIK是悬浮生长,所以一般是补液,全量换液的话需要离心,也会把细胞分泌的细胞因子离掉,可能不利于细胞的生长,当然直接补液的话,里面会残留细胞的代谢物,也有可能对细胞生长不利,当然是猜测啊,没有实验性证据,只是对比过全量换液和补液的方法,基本差不多,所以从操作方便的角度考虑,基本采取补液,仅个人观点。
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发表于 2015-7-15 10:37 |只看该作者
啊,我在全量换液之前是需要静止30分钟到一个小时的,还想请教几个问题1.做流式是一般第几天做,用多少毫升培养液?细胞密度是多大?2 m  h% n1 U' l# _! o$ |
2.培养过程中,细胞密度和培养液量应该保持什么关系呢?是始终保持在10的六次方还是多少(每ml)
5 t# t+ ~/ a) }8 a; J8 r( c% T0 N0 [- {
谢谢
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发表于 2015-7-15 10:39 |只看该作者
做cik没有换过液,就一直补液加因子。一般都是2-3天倍比。
/ S! c; k; F' R. Z2 S我觉得应该看密度,太稀太浓都不好。加液量我觉得还是可以灵活控制的, 长得好几倍几倍加,涨的慢的就少加一点。
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