人脐带间充质干细胞求助

冰冻瞬间

2 C6 Y3 ~) Z1 g% r8 m" b

$ ?( r4 [( m8 b, N* {* i+ b我做了一批人脐带间充质干细胞，细胞状态都是不错的，我测了8个表型，CD105，CD73，CD90，CD45，CD34，CD14，CD79，HLA-DR,其中CD73，CD90 95%以上，CD45，CD14，CD79，HLA-DR在2%以下，但是CD105测了几次有时90%以上，有时就50%左右，CD34也是，有时低2%，有时30%左右，这是为什么，哪位高手帮我分析下，图我这上传不了，谢谢了

hitmanc

脐带来源的间充质干细胞基本不可能CD34高到30%，肯定是流式检测出的问题，你自己排除下吧。

ych123

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1 a$ a% Y7 ~" V" u6 i
亲，你的脐带间充质干细胞怎么养出来的啊，可以传授点经验吗，我都养了一个月了，还没啥结果，我养出来了也要做坚定

ych123

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楼主能帮我看看我的细胞吗，，急急急

zhangmingqi111

你是什么代次做的流式，P4-P5一般CD105都会在90%左右，大约P6貌似105就低

冰冻瞬间

1 d) p  I. w, f* v$ x# @. J" {; x# Q% e8 B9 m
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) t4 \# }& \/ H" t7 L7 C1 R$ P% o- ~5 P
谢谢，我APC标记的，我现在找到问题，标记后洗一遍30%，洗两次后就5%左右，在洗就将到2%以下了，所以这个抗体出问题了，换了抗体就好了
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axiazhuang

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1 V  t# N' ]6 i9 P
9 m7 i3 @  @7 L你是不是原代MSC就没有养出来？无菌剪碎或者镊子撕下脐带胶质，均匀贴附到皿或者瓶底，加入含干细胞因子的基础培养基（全培养基），第4-5天可以换液，7天左右会有组织块周围爬出细胞，一般11-12天后局部细胞密度会增多到融合率80%，才可以消化后传代。

ych123

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哦，谢谢。我用的脐带血密度梯度离心提取 的细胞，我想问一下用低糖的DMEM+10%胎牛血清，没有加生长因子和谷氨酰胺能养出来间充质干细胞吗，我看好多文献都加了

colins

脐带间充质干细胞很容易培养，而且表型也比较稳定，你其他指标和合适的，基本上你培养的问题也不大，可以试着考虑换一台流式细胞仪，因为如果是一些轻便的流式细胞仪，比如BD的C6等做出来的结果又是就是不是很稳定，我就遇到过，只是我的是CD73不稳定，在其他流式细胞仪上试试吧，排除仪器的问题以后再找原因。

冰冻瞬间

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谢谢了，现在问题已经解决了